23. Л. Пастердің
Микроағзаларды бөліп алу. Қоректік орталар. Кох әдісі
жүктеу/скачать 132,41 Kb.
|
микро
- Бұл бет үшін навигация:
- Микроорганизмдерді бөліп алу әдістері
| 26 Микроағзаларды бөліп алу. Қоректік орталар. Кох әдісі.
микроорганизмдердің оқшаулануы қызығушылық тудыратын микробтардың түрлерін табиғи мекендеу ортасынан тіршілік ортасына бөліп алу және ажырату үшін қолданылатын әдістер жиынтығын қамтиды in vitro. Бұл әдістер микробиологиялық зерттеулерге арналған көптеген негізгі және қажетті құралдардың жиынтығы болып табылады. Белгілі және ғылыммен анықталған микроорганизмдердің көпшілігі оқшауланған және ішінара олар тұратын жердің ішкі жағдайларын модельдейтін контейнерлерде сақталған микроорганизмдер. Микроорганизмдерді оқшаулауды алғаш қолданған адамдардың бірі Антон Ван Левенгук (1632-1723 жж.) Болды, ол көптеген жерлер мен экожүйелерден микробтардың үлгілерін жинап алып, оларды жүздеген микроскоптардың астынан мұқият бақылап отырды. Алайда, ғалымдар Луи Пастер мен Роберт Кохтың уақытында ғана, 19 -шы ғасырда, белгілі бір микроорганизмдерді оқшаулауға қызмет ететін қатаң тәжірибелер жүргізіле бастады. оларды егжей-тегжейлі .. Левенгуктан айырмашылығы, бұл зерттеушілер қоршаған ортадағы микробтардың басқа түрлерінен анықталған түрлерді оқшаулауға назар аударды. Бұған қоса, оларды табиғи ортадан тыс жерде мүмкіндігінше ұзақ өмір сүруге мүдделі болды. Бүгінгі таңда биосферадағы кез келген ортадан алынған көптеген әртүрлі микроорганизмдерді оқшаулау мен өсірудің нақты әдістері жасалды. Мақалалар индексі 1 Микроорганизмдерді бөліп алу әдістері 1.1 Сызаттар немесе сызаттар 1.2 Орта немесе жабындымен біріктіру 1.3 Сериялық разбавкалар 1.4 Байыту процедурасы 1.5 Бірегей немесе эксклюзивті техника 1.6 Жеке әдістер 2 Маңыздылық 3 Әдебиеттер Микроорганизмдерді бөліп алу әдістері Микроорганизмдердің барлық изоляциясы қызығушылық тудыратын микроорганизмдер кездесетін табиғатта үлгіні алудан басталады. Бұл жерлер жануарлар немесе өсімдік тіндеріндегі жаралар, топырақтар немесе субстраттар, шалшықтар, теңіздер, тері сияқты беттер және т.б. Сынамаларды іріктеу оны оқшаулау қажет бетінде микроорганизмдердің өсуіне тиісті талаптары бар ортасы бар ыдысты ұстау немесе қолдау арқылы жүзеге асырылады. Бұл контейнерде сіз микробтардың «мәдениетін» деп аталатын нәрсені аласыз. Әдетте, табиғи ортадан алынатын алғашқы дақыл, сөзсіз, «аралас дақыл» болып табылады, яғни ол көптеген микробтардың әр түрлі түрлерінен тұрады. Дегенмен, микроорганизмдердің көпшілігін зертханада бір-бірінен оқшаулауға болады, тек қызығушылық түрі өсетін микроағзалар дақылдарын алуға немесе басқаша айтқанда, «таза дақылдарды» алуға ұмтылады. Негізінде, «таза дақылдарды» алу үшін жүргізілетін процесс «микроорганизмдерді оқшаулау» деп аталады. Микроорганизмдерді оқшаулаудың көптеген әдістері бар, тіпті микроорганизмдердің белгілі бір түріне тән кейбіреулері бар. Басқа жағдайларда табиғи ортадан үлгіні жинау арқылы ғана таза дақыл алуға болады. Қоректік ортаны дайындау кезінде мәдени микроорганизмдердің әртүрлі қоректік заттарға қажеттілігін ескеру қажет. Қоректік ортаның әртүрлі жіктелімдері бар. Қоректік орталардың құрамы бойынша жіктелуі: 1. Қарапайым орталар (MPB, Mpa, желатин, пептон суы). Ет-пептон сорпасы (MPB) барлық ортаның ақуыздық негізі болып табылады. MPB дайындаудың бірнеше әдісі бар: а) дайын пептон қосылған ет суында (ақуыздың толық қорытылмайтын өнімі) – бұл ет пептон сорпасы деп аталады; б) ферменттердің көмегімен бастапқы шикізатты гидролиздеу өнімдерінің ас қорытуларында (трипсин – Хоттингер сорпасы, пепсин – Мартен сорпасы). Ет-пептон агары(МПА) – arap-arapa МПБ-ға қосу жолдарын алады (l,5-3%). Егер МПА пробирканың немесе бөтелкенің диагоналі бойынша таралса, бұл қиғаш агар.Егер орта пробиркада биіктігі 5-7 см тігінен таралса, бұл бағаналы агар. Петри Табақшаларында пластина түрінде қатып қалған МПА – пластиналы агар. Егер ортаның биіктігі 2-3 см тік қабаты болса және диагональды қабаты бірдей болса, бұл жартылай кесілген агар. 2. Күрделі орталар белгілі бір қоспалары бар қарапайым (көмірсулар, қан, өт, жұмыртқа, Сарысу, сүт, тұздар, өсу факторлары және т. б.) негізінде дайындалады Қоректік орталарды бастапқы компоненттер бойынша жіктеу: 1.Табиғи қоректік орта-бұл жануарлардан немесе өсімдіктерден алынатын табиғи өнім. Болуы мүмкін: Өсімдік (бастапқы өнімдер – соя, бұршақ, картоп, сәбіз және т. б.) Жануарлар (бастапқы өнімдер-ет, балық, жұмыртқа, сүт, Жануарлар тіндері, өт, қан сарысуы.және т. б.) Аралас (МПА, Левенштейн – Йенсен ортасы және т. б.) 2. Жасанды ортада өңделген табиғи өнімдер (ет суы, ас қорыту), осы өнімдерден алынған заттар (пептон, ашытқы және жүгері сығындылары) және әртүрлі қоспалар бар. Бұл ең көп қолданылатын орталардың ең үлкен және әр түрлі құрамы. Олар Бейорганикалық тұздар, көмірсулар мен азотты заттар қосылған жануарлардың немесе өсімдіктердің әртүрлі инфузияларынан немесе қайнатпаларынан белгілі бір рецепттер бойынша дайындалады. 3. Синтетикалық орталар (белгілі химиялық құрамы) дәл белгіленген концентрациядағы химиялық таза қосылыстардан тұрады (көмірсулар, тұздар, аминқышқылдары, дәрумендер және т.б. қосылған). Осы орталар негізінде оларға табиғи немесе жасанды орталарды қосу арқылы жартылай синтетикалық орталар алынады. Қоректік орталардың консистенциясы бойынша жіктелуі: орталар боладысұйық (агарсыз орталар),жартылай сұйық(агармен 1% дейін),тығыз (агар – 1,5-2,5%). Сұйық орталар микроорганизмдердің физиологиялық және биохимиялық ерекшеліктерін зерттеу үшін, биомасса мен метаболизм өнімдерін жинақтау үшін жиі қолданылады. Жартылай сұйық орталар әдетте дақылдарды сақтау үшін қолданылады, тығыз — микроорганизмдерді оқшаулау, колониялардың морфологиясын зерттеу, диагностикалық мақсаттар, сандық есепке алу, антагонистік қасиеттерді анықтау және т жүктеу/скачать 132,41 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|