Антибиотики: понятие, классификация антибиотиков по способу получения, химической структуре, механизму и спектру действия. Термин «антибиотик»
Пути преодоления лекарственной устойчивости бактерий
жүктеу/скачать 38,3 Kb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам.
- Минимальная подавляющая концентрация (МПК) - наименьшая концентрация антибиотика (мг/л или мкг/мл), которая in vitro полностью подавляет видимый рост бактерий
- Clinical and Laboratory Standards Institute
| Пути преодоления лекарственной устойчивости бактерий.
Человечество начинает осозновать угрозу распространения бактерий с множественной лекарственной устойчивостью. Всемирная организация здравоохранения, совместно с Европейским союзом в 2001 г. приняла документ под названием «Глобальная стратегия ВОЗ по сдерживанию устойчивости к АМХ». Стратегия включает меры, направленные на: - осознание серьезности проблемы резистентности на государственном уровне; - мониторинг антибиотикорезистентности в отделении, больнице, регионе для адекватного подхода к эмпирической терапии; - внедрение разумного использования антибиотиков путем реализации мер образовательного характера на разном уровне. Меры образовательного характера на разном уровне включают: Применение антимикробных химиопрепаратов строго по показаниям. Избегать применения антимикробных химиопрепаратов с профилактической целью. Ограничение свободной продажи антимикробных химиопрепаратов в аптечной сети. Ограничение распространения средств гигиены (мыло, зубные пасты, крема, гели и т.д.), содержащих антибактериальные вещества. Использовать только с лечебной целью. Отказ от применения в ветеринарной практике (для ускоренного роста, профилактики и лечения заболеваний животных) антимикробных химиопрепаратов, используемых в медицине. Отказ от использования антимикробных химиопрепаратов в качестве консервантов пищевых продуктов. Адекватный выбор режима антимикробной химиотерапии. Кроме этих мер систематически получают новые химиопрепараты, которые отличаются от существующих механизмом антибактериального действия. Перспективным направление является химическая модификация антибиотиков с защищенными активными группами, устойчивыми к бактериальным ферментам. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Методы определения чувствительности бактерий к антибиотикам делятся на 2 группы: диффузионные и методы разведения. Диффузионные методы: с использованием дисков с антибиотиками; с помощью Е-тестов. Методы разведения: разведение в жидкой питательной среде (бульоне); разведение в агаре При определении чувствительности диско-диффузионным методом на поверхность агара в чашке Петри наносят бактериальную суспензию определенной плотности (обычно эквивалентную стандарту мутности 0,5 по McFarland) и затем помещают диски, содержащие определенное количество антибиотика. Диффузия антибиотика в агар приводит к формированию зоны подавления роста микроорганизмов вокруг дисков. После инкубации чашек в термостате при температуре 350-370 С в течение 18 часов учитывают результат путем измерения диаметра зоны вокруг диска в миллиметрах (рис. 1). http://krasgmu.ru/umkd_files/metod/1_disko-diffuznyy_metod.png Рис. 1. Определение чувствительности микроорганизмов диско-диффузионным методом. Определение чувствительности микроорганизма с помощью Е-теста проводится аналогично тестированию диско-диффузионным методом. Отличие состоит в том, что вместо диска с антибиотиком используют полоску Е-теста, содержащую градиент концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (рис. 2). В месте пересечения эллипсовидной зоны подавления роста с полоской Е-теста получают значение минимальной подавляющей концентрации (МПК). http://krasgmu.ru/umkd_files/metod_new/5566.pnghttp://krasgmu.ru/umkd_files/metod_new/5566.png Рис. 2. Определение чувствительности микроорганизмов с помощью Е-тестов. Несомненным достоинством диффузионных методов является простота тестирования и доступность выполнения в любой бактериологической лаборатории. Однако с учетом высокой стоимости Е-тестов для рутинной работы обычно используют диско-диффузионный метод. Методы разведения основаны на использовании двойных последовательных разведений концентраций антибиотика от максимальной к минимальной (например от 128 мкг/мл, 64 мкг/мл, и т.д. до 0,5 мкг/мл, 0,25 мкг/мл и 0,125 мкг/мл). При этом антибиотик в различных концентрациях вносят в жидкую питательную среду (бульон) или в агар. Затем бактериальную суспензию определенной плотности, соответствующую стандарту мутности 0,5 по MсFarland, помещают в бульон с антибиотиком или на поверхность агара в чашке. После инкубации в течение ночи при температуре 35о-37оС проводят учет полученных результатов. Наличие роста микроорганизма в бульоне (помутнение бульона) или на поверхности агара свидетельствует о том, что данная концентрация антибиотика недостаточна, чтобы подавить его жизнеспособность. По мере увеличения концентрации антибиотика рост микроорганизма ухудшается. Первую наименьшую концентрацию антибиотика (из серии последовательных разведений), где визуально не определяется бактериальный рост принято считать минимальной подавляющей концентрацией (МПК). Измеряется МПК в мг/л или мкг/мл (рис. 3). Минимальная подавляющая концентрация (МПК) - наименьшая концентрация антибиотика (мг/л или мкг/мл), которая in vitro полностью подавляет видимый рост бактерий http://krasgmu.ru/umkd_files/metod_new/5567.pnghttp://krasgmu.ru/umkd_files/metod_new/5567.png Рис. 3. Определение значения МПК методом разведения в жидкой питательной среде. Интерпретация результатов определения чувствительности. На основании получаемых количественных данных (диаметра зоны подавления роста антибиотика или значения МПК) микроорганизмы подразделяют на чувствительные, умеренно резистентные и резистентные. Для разграничения этих трех категорий чувствительности (или резистентности) между собой используют так называемые пограничные концентрации (breakpoint) антибиотика (или пограничные значения диаметра зоны подавления роста микроорганизма). Пограничные концентрации не являются неизменными величинами. Они могут пересматриваться, в зависимости от изменения чувствительности популяции микроорганизмов. Разработкой и пересмотром критериев интерпретации занимаются ведущие специалисты (химиотерапевты и микробиологи), входящие в специальные комитеты. Одним из них является Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам США (Clinical and Laboratory Standards Institute - CLSI). В настоящее время стандарты CLSI признаны в мире и используются как международные для оценки результатов определения чувствительности бактерий при многоцентровых микробиологических и клинических исследованиях. Существуют два подхода к интерпретации результатов определения чувствительности: микробиологический и клинический. Микробиологическая интерпретация основана на анализе распределения значений концентраций антибиотика, подавляющих жизнеспособность бактерий. Клиническая интерпретация основана на оценке эффективности антибактериальной терапии. жүктеу/скачать 38,3 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|