ҚАЗАҚСТАННЫҢ АӨК ИННОВАЦИЯЛЫҚ ДАМУЫ: АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ, ВЕТЕРИНАРЛЫҚ ЖӘНЕ

ҚАЗАҚСТАННЫҢ АӨК ИННОВАЦИЯЛЫҚ ДАМУЫ: АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ, ВЕТЕРИНАРЛЫҚ ЖӘНЕ 
ТЕХНИКАЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРДЫҢ ДАМУ ТЕНДЕНЦИЯЛАРЫ 
ИННОВАЦИОННОЕ РАЗВИТИЕ АПК КАЗАХСТАНА: ТЕНДЕНЦИИ РАЗВИТИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ, 
ВЕТЕРИНАРНЫХ И ТЕХНИЧЕСКИХ НАУК 
 
237 
 
 
Figure 1. Symptoms of ApMV on hazelnut bushes. 
 
 
Serological Assays 
Each insect sample was identified, put in a polyethylene bag and kept at -20
o
C until ELISA tests were 
done.  DAS-ELISA  was  performed  according  to  Clark and  Adams  (1977)  using  ApMV  polyclonal  antiserum 
(hop isolate) from Loewe (Sauerlach, Germany) at the recommended dilution. Absorbance values were read 
at 405 nm using a microplate reader (Tecan Spectra II, Grödig/Salzburg, Austria). Samples were considered 
positive when the absorbance values at 405 nm exceeded the mean of the negative control (negative control 
of Loewe) by a factor of at least three (Aramburu and Rovira, 1998). 
 
RESULTS AND DISCUSSION 
Insect and mite pests are major detriments to hazelnut production throughout in Turkey. Approximate-
ly 150 species have been found feding on hazelnuts in the Black Sea Region of Turkey (Tuncer and Ecevit, 
1997;Tuncer et. al., 2001). Most of plant viruses are require vectors such as insects for their spread in the 
nature. Despite the importance of vector transmission in virus epidemiology, the natural vector remains un-
known for many viruses including ApMV.  
In this study, a total of 893 insect belonging to 7 order including 19 families [Cerambycidae, Chryso-
melidae, Curculionidae, Oedemeriidae, Scarabeidae, Coccinellidae (Coleoptera); Forficulidae (Dermoptera); 
Coreidae,  Nabidae,  Pentatomidae  (Hemiptera);  Cicadellidae,  Cicadidae,  Issidae  (Homoptera);  Formicidae, 
Vespidae  (Hymenoptera);  Acrididae,  Gryllidae,  Tettigonidae  (Orthoptera)  and  Chrysopidae  (Neuroptera)] 
were collected from ApMV-infected hazelnut orcherds and tested by DAS-ELISA for this virus. The virus was 
detected by DAS-ELISA in only a sample of Melolantha melolantha (adult) belonging to Scarabeidae family. 
Rest of the insect species were not found to be positive for ApMV (Table 1). Arli-Sokmen et al. (2005) indi-
cated that a slow natural spread of ApMV infection was observed in hazelnut orchards in the middle Black 
Sea region. For this reason, the same researchers emphasis that this may ApMV is spread by a slow-moving 
arthropod vector  (Arli-Sokmen  et  al.,  2005).  Up  to  now,  beetle vectors  of  plant viruses  has  been  known  in 
only  four  families  including  Chrysomellidae,  Coccinellidae,  Curculionidae  and  Meloidae  (Gergerich,  2001). 
Besides this, M. melolontha is not a very widespread insect species in hazelnut plantations in the Black Sea 
region of Turkey (Tuncer  et. al. 2001).  
Consequently, our study did not include experiments to elucidate the mechanism of ApMV transmison 
by insect vectors to hazelnut or weed in nature. There is needed detailed transmission experiments of ApMV 
by M. melolantha in vitro.  
 
 
ACKNOWLEDGEMENT 
The work presented has been funded by Ondokuz Mayis University, Scientific Research Fund (BAP), 
The Grant Number: PYO.ZRT.1901.09.002. 
 
References: 
1.Akbas, B., Ilhan, D. and Atlamaz, A., 2004. A preliminary survey for hazelnut (Corylus avellana L.) 
viruses in Turkey. 6th Int. Congr. on Hazelnut (14−18 June, 2004. Tarragona, Reus, Spain) Abstract Book. 
p.94. 

ҚАЗАҚСТАННЫҢ АӨК ИННОВАЦИЯЛЫҚ ДАМУЫ: АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ, ВЕТЕРИНАРЛЫҚ ЖӘНЕ 
ТЕХНИКАЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРДЫҢ ДАМУ ТЕНДЕНЦИЯЛАРЫ 
ИННОВАЦИОННОЕ РАЗВИТИЕ АПК КАЗАХСТАНА: ТЕНДЕНЦИИ РАЗВИТИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ, 
ВЕТЕРИНАРНЫХ И ТЕХНИЧЕСКИХ НАУК 
 
238 
 
2.Aramburu, J., Rovira, M., 1998. The effects of Apple mosaic ilarvirus (ApMV) on hazelnut (Corylus 
avellana L.). Journal of Horticultural Science and Biotechnology, 73: 97-101. 
3.Aramburu,  J.,  Rovira,  M.,  2000. Incidence  and  natural  spread  of  Apple mosaic ilarvirus  in  hazel in 
North-east Spain. Plant Pathology, 49: 423-427.  
4.Arli-Sokmen,  M.,  Sevik,  M.A.  and  Yilmaz,  M.A.  2004.  Incidence  of  Apple  mosaic  virus  infection  in 
hazelnut  (Corylus  avellana  L.)  orchards  of  Samsun  province.  Proc.  First  Plant  Prot.  Congr.  Turkey.  (8−10 
September, 2004, Samsun). p.173. 
5.Arli-Sokmen, M., Kutluk-Yilmaz, N.D., Mennan, H. and Sevik, M.A. 2005. Natural weed hosts of Ap-
ple mosaic virus in hazelnut orchards in Turkey. J. Plant Path. 87: 239-242. 
6.Clark, M.  and  Adams,  A.M.  1977.  Characteristics  of  microplate method  of  enzyme-linked  immuno-
sorbent assay for the detection of plant viruses. Journal of General Virology, 34: 475-483. 
7.Fulton,  R.W.  1972.  CMI/AAB.  Descriptions  of  Plant  Viruses.  No:  83.  Association  of  Applied  Biolo-
gists, Wellesbourne, UK. 
8.Gergerich,  R.C.,  2001.  Mechanism  of  virus  transmission  by  leaf  feding  beetles.  In:  Harris,  K.F., 
Smith, O.P and Duffus, J.E. (Eds.). Virus- Insect-Plant Interactions, pp.133-142. New York: Academic Press. 
9.Marenaud, C. and Germain, E. 1975. La Mosaique du noiseiter. Ann. Phytopath. 7:133−145. 
10.Myrta, A., Di Terlizzi, B., Savino, V. and Martelli, G.P. 2003. Virus diseases affecting the Mediterra-
nean stone fruit industry: a decade of surveys. p.15−23. In: A. Myrta, B. Di Terlizzi and V. Savino (eds.), Vi-
rus  and  virus-like  diseases  of  stone  fruits,  with  particular  reference  to  the  Mediterranean  region.  Bari,  Ci-
heam-Iamb Options Méditerranéennes: Série B. Etudes et Recherches n.45. 
11.Postman,  J.D.  and  Cameron,  H.R.  1987.  Apple  mosaic  virus  in  US  filbert  germplasm.  Plant  Dis-
ease 71: 944-945. 
12.Rybicki,  E.P.  1995.  The  Bromoviridae.  p.450-457.  In:  F.A.  Murphy,  C.M. Fauquet,  D.H.L.  Bishop, 
S.A. Ghabrial, A.W. Jarvis, G.P. Martelli, M.A. Mayo and M.D. Summers (eds.), Virus Taxonomy. Sixth Re-
port of the International Committee on Taxonomy of Viruses, Vienna and New York: Springer-Verlag. 
13.Scaramuzzi, G.  and  Ciferri,  R.  1957.  Una  nuova virosis:  la macuratura lineare  del  nocciolo.  Anali 
Dell’istituto Sperimentale Agronomico, 11: 61−71. 
14.Sevik, M. A., 2015. Occurrence and distribution of Apple mosaic virus on hazelnut cultivars in Gire-
sun, Turkey. Biosci. J. 31 (5): 1307-1311. 
15.Shiel,  P.J.  and  Berger,  P.H.  2000.  The  complete  nucleotide  sequence  of  Apple  mosaic  virus 
(ApMV)  RNA  1  and  RNA  2:  ApMV  is more  closely  related  to  Alfalfa  mosaic  virus  than  to  other  ilarviruses. 
Journal of General Virology, 81: 273−278. 
16.Sweet, J.B. and Barbara, D.J. 1979. A yellow mosaic disease of horse chestnut caused  by Apple 
mosaic virus. Ann. Appl. Biol. 92: 335−341. 
17.Tasias, J. 1975. El Avellano En La Provincia de Tarragona. Reus, Spain: Diputacion de Tarragona. 
18.Tuncer, C. and Ecevit, O. 1997. Current status of hazelnut pests in Turkey. Acta Hort. 445:545-
552. 
19.Tuncer, C., Akça, İ. and Saruhan, İ. 2001. Integrated pest management in Turkish hazelnut orc-
hards. Acta Hort. 556:419-429. 
20.Tzenatakis, I.E. and Martin, R.R. 2005. First Report of Strawberry as a Natural Host of Apple mo-
saic virus. Plant Disease, 89: 431. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

ҚАЗАҚСТАННЫҢ АӨК ИННОВАЦИЯЛЫҚ ДАМУЫ: АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ, ВЕТЕРИНАРЛЫҚ ЖӘНЕ ТЕХНИКАЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРДЫҢ ДАМУ ТЕНДЕНЦИЯЛАРЫ 
ИННОВАЦИОННОЕ РАЗВИТИЕ АПК КАЗАХСТАНА: ТЕНДЕНЦИИ РАЗВИТИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ, ВЕТЕРИНАРНЫХ И ТЕХНИЧЕСКИХ НАУК 
 
239 
 
Table 1. Insects collected from hazelnut orchards and their obtained ELISA absorbance values 
Order 
Family 
Species 
Sample collected years 
2009 
2010 
2011 
Number of 
tested 
samples 
Mean 
absorbance 
values 
Number of 
tested 
samples 
Mean 
absorbance 
values 
Number of 
tested 
samples 
Mean 
absorbance 
values 
Coleoptera 
Cerambycida
e 
Hylotrupes bajulus 
NC* 
-** 
NC 
- 
13 
0.093 (-) 
Chrysomelida
e 
Chrysolina spp. 
NC 
- 
NC 
- 
4 
0.160 (-) 
Leptinotarsa 
decemlineata 
NC 
- 
NC 
- 
7 
0.202 (-) 
Curculionidae 
Curculio nucum 
18 
0.165 (-) 
23 
0.178 (-) 
17 
0.205 (-) 
Anoplus roboris 
8 
0.138 (-) 
5 
0.178 (-) 
2 
0.212 (-) 
Polydrusus sp. 
11 
0.122 (-) 
9 
0.189 (-) 
5 
0.116 (-) 
Phyllobius spp. 
35 
0.134 (-) 
NC 
- 
NC 
- 
 
NC 
- 
1 
0.251 (-) 
NC 
- 
Otiorrrhynchus 
bractialis 
NC 
- 
NC 
- 
12 
0.151 (-) 
Apion spp. 
NC 
- 
NC 
- 
 
0.142 (-) 
Oedemeriidae  Oedemera sp. 
NC 
- 
NC 
- 
5 
0.117 (-) 
Scarabaeidae 
Polyphylla fullo 
2 
0.137 (-) 
NC 
- 
8 
0.174 (-) 
Melolontha melolontha 
3 
0.149 (-) 
NC 
- 
10 
1.102 (+) 
Hoplia pellinosa 
3 
0.130 (-) 
NC 
- 
NC 
- 
Coccinellidae 
 
7 
0.144 (-) 
NC 
- 
NC 
- 
Adalia bipunctata 
NC 
- 
5 
0.160 (-) 
13 
0.140 (-) 
Coccinella 
septempunctata 
NC 
- 
4 
0.172 (-) 
7 
0.149 (-) 
Propylea 
quatuordecimpunctata 
NC 
- 
8 
0.203 (-) 
6 
0.160 (-) 
Dermoptera 
Forficulidae 
Forficula auricularia 
NC 
- 
24 
0.152 (-) 
19 
0.111 (-) 
Hemiptera 
Coreidea 
Gonocerus 
acuteangulatus 
31 
0.134 (-) 
15 
0.195 (-) 
19 
0.091 (-) 
Coreus marginatus 
NC 
- 
NC 
- 
7 
0.216 (-) 
Nabidae 
Himacerus apterus 
NC 
- 
NC 
- 
3 
0.146 (-) 
Pentatomidea 
Eurydema spp. 
NC 
- 
NC 
- 
3 
0.165 (-) 
Palomena prasina 
21 
0.124 (-) 
34 
0.171 (-) 
41 
0.145 (-) 
Raphigaster nebulosa 
15 
0.152 (-) 
4 
0.154 (-) 
NC 
- 
Arma custos 
12 
0.127 (-) 
11 
0.222 (-) 
7 
0.126 (-) 
Dolycoris baccarum 
NC 
- 
3 
0.168 (-) 
3 
0.201 (-) 

ҚАЗАҚСТАННЫҢ АӨК ИННОВАЦИЯЛЫҚ ДАМУЫ: АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ, ВЕТЕРИНАРЛЫҚ ЖӘНЕ ТЕХНИКАЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРДЫҢ ДАМУ ТЕНДЕНЦИЯЛАРЫ 
ИННОВАЦИОННОЕ РАЗВИТИЕ АПК КАЗАХСТАНА: ТЕНДЕНЦИИ РАЗВИТИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ, ВЕТЕРИНАРНЫХ И ТЕХНИЧЕСКИХ НАУК 
 
240 
 
Graphosoma lineatum 
NC 
- 
NC 
- 
6 
0.167 (-) 
Cicadellidae 
 
33 
0.144 (-) 
 
 
 
 
Cicadella viridis 
NC 
- 
23 
0.170 (-) 
18 
0.132 (-) 
Ledra sp. 
NC 
- 
NC 
- 
6 
0.142 (-) 
Typhlocyba sp. 
NC 
- 
14 
0.196 (-) 
14 
0.112 (-) 
Cicadidae 
 
4 
0.169 (-) 
 
 
 
 
Issidae 
Issus coleoptratus 
NC 
- 
35 
0.202 (-) 
35 
0.124 (-) 
Hymenoptera 
Formicidae 
 
NC 
- 
NC 
- 
36 
0.113 (-) 
Vespidae 
 
NC 
- 
NC 
- 
5 
0.132 (-) 
Orthoptera  
Acrididae 
 
17 
0.124 (-) 
7 
0.203 (-) 
11 
0.109 (-) 
Gryllidae 
Oecanthus pellucens 
2 
0.121 (-) 
16 
0.166 (-) 
19 
0.147 (-) 
Tettigoniidae  
Poecilimon sp.  
4 
0.118 (-) 
21 
0.165 (-) 
13 
0.144 (-) 
Phaneroptera nana 
3 
0.118 (-) 
21 
0.165 (-) 
NC 
- 
Neuroptera 
Chrysopidae  Chrysoperla carnea 
6 
0.157 (-) 
5 
0.163 (-) 
7 
0.143 (-) 
 
19 
 
224 
 
288 
 
381 
 
Negative Control (-C) (Loewe) 
0.156 
 
0.176 
 
0.144 
Positive Control (+C) (Loewe) 
2.563 
 
2.291 
 
1.338 
*NC: not collected; **-: not tested; (-): negative, (+): positive 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

ҚАЗАҚСТАННЫҢ АӨК ИННОВАЦИЯЛЫҚ ДАМУЫ: АУЫЛШАРУАШЫЛЫҚ, ВЕТЕРИНАРЛЫҚ ЖӘНЕ 
ТЕХНИКАЛЫҚ ҒЫЛЫМДАРДЫҢ ДАМУ ТЕНДЕНЦИЯЛАРЫ 
ИННОВАЦИОННОЕ РАЗВИТИЕ АПК КАЗАХСТАНА: ТЕНДЕНЦИИ РАЗВИТИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ, 
ВЕТЕРИНАРНЫХ И ТЕХНИЧЕСКИХ НАУК 
 
241 
 
УДК: 616-097.3; 577.175.642(045) 
 
СИНТЕЗ ИММУНОГЕНОВ СТЕРОИДНЫХ ГОРМОНОВ ЭСТРАДИОЛА  
17В И ТРЕНБОЛОНА АЦЕТАТА С ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНЫМИ  
НОСИТЕЛЯМИ 
 
Умаров 
А.Б. 
– 
магистрант, 
Костанайский 
государственный 
университет 
им. 
А.Байтурсынова 
Кравченко 
А.В. 
– 
докторант, 
Костанайский 
государственный 
университет 
им. 
А.Байтурсынова 
Бермухамедов 
Ж.Ж. 
– 
м.т.н., 
Костанайский 
государственный 
университет 
им. 
А.Байтурсынова 
Рыщанова  Р.М.  –  к.в.н.,  доцент,  Костанайский  государственный  университет  им. 
А.Байтурсынова 
Кулакова  Л.С.  -  к.в.н.,    доцент,  Костанайский  государственный  университет  им. 
А.Байтурсынова 
 
В статье приведены результаты тестирования синтезированных конъюгатов.  Иммуноге-
ны  получали  к  антигенным  детерминантам  гормонов.  Были  разработаны  методики  получения 
препаратов  конъюгатов.  В  качестве  носителей  к  гаптенам  гормональных  веществ  эстрадиол 
17В  и  тренболон  ацетат  использовались  белки:  бычий  сывороточный  альбумин  (BSA),  альбумин 
белка куриного яйца (ОVА), тиреоглобулин (ТHY), Keyhole limpet hemocyanin (KLH). Приготовленны 
и очищены препараты конъюгаты. Произведено тестирование полученных конъюгатов методом 
иммуноферментного анализа. Проведена интерпретация полученных результатов. 
          Ключевые  слова:  иммунная  сыворотка,  конъюгация,  конъюгат,  белок-носитель,  иммуноген, 
гаптен, диализ, эстрадиол, тренболон. 
 
Животноводческая промышленность – термин который подразумевает не только выработку оп-
ределенной продукции и снабжение последней населения, оно также влечет за собой огромную кон-
куренцию  и  желание  получить  большее  количество  выработки  товара  в  кратчайшие  сроки.  Гормо-
нальные препараты стимулирующие рост животных широко используются во многих странах при ве-
дении животноводства, что влечет вынужденный характер определения остаточного количества дан-
ных веществ в продуктах животного происхождения. [1,2, с.136,77]. На сегодняшний день для индика-
ции гормонов в животноводческой продукции широко используют иммуноферментный анализ (ИФА), 
основанный  на  применении  иммунных  сывороток  содержащих  антитела  специфичные  к  антигенным 
детерминантам гормона. [3,4,5, с.218,17,309]. Одной из главных проблем при получении антител про-
тив стероидных гормонов, является их относительно низкая молекулярная масса. Это является глав-
ной  причиной  отсутствия  иммунного  ответа  на  введение  гормона  в  организм  животного,  и  требует 
предварительной подготовки антигена – конъюгации. Конъюгация – процесс сшивания низкомолекул-
лярного вещества, не способного вызвать иммунного ответа (гаптена) и крупной молекулы – высоко-
молекулярного белка носителя. Конъюгация является неотъемлемой частью получения антисыворо-
ток к некоторым гормонам, следовательно детекция гормонов в продуктах животного происхождения 
без конъюгации невозможна. [2,6,9, с.378,67,408]. 
В  данной  работе  представлено  несколько  способов  получения  препаратов  конъюгатов  гормо-
нов эстрадиола 17В (EST) и тренболон ацетата (TR), разработанных в лаборатории ИНОЦ КГУ им. А. 
Байтурсынова  и  ТОО  НИИ  Биотехнологии.  Исследования  выполнялись  в  рамках  проэктов:  «Разра-
ботка  отечественной  тест-системы  иммуноферментного  анализадля  определения  эстрадиола  17В  в 
продуктах животного происхождения», «Разработка отечественной тест-системы ИФА для определе-
ния тренболона в животноводческой продукции» при грантовом финансировании МОН РК. 
Цель работы: Получить высокоактивные препараты конъюгатов к гаптенным детерминантам эс-
традиола 17В и тренболон ацетата при использовании различных гетерогенных высокомолекулярных 
носителей. 
 
Материалы и методы исследования 
Приготовление конъюгатов осуществлялось при сшивании гаптенов гормональных веществ  эс-
традиол  17В  и  тренболон  ацетата  с  гетерологичными  носителями:  бычий  сывороточный  альбумин 
(BSA), альбумин белка куриного яйца (ОVА), тиреоглобулин (ТHY), Keyhole limpet hemocyanin (KLH). 
Приготовление препаратов конъюгатов гормона эстрадиол с носителями 

жүктеу/скачать 39,27 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: