Экспериментальная часть
Цель: приготовить питательную среду для культивирования мик-
роорганизмов микрофлоры воздуха, воды.
План работы:
1. Познакомиться с основными средами для культивирования мик-
роорганизмов, методами стерилизации посуды.
2. Приготовить питательную среду из готового полусинтетического
порошка МПА.
3. Посеять микрофлору воздуха в различных вариантах опыта.
4. Посеять микрофлору воды в различных вариантах опыта.
Материалы и оборудование: стерильные чашки Петри, маркер по
стеклу, аналитические весы, плитка, дистиллированная вода, стеклян-
ные палочки, сушильный шкаф, термостат, химический стакан, полу-
синтетический МПА.
1. Приготовление питательной среды (МПА) для исследования
микрофлоры воды, воздуха
Питательная среда мясо-пептонный агар (МПА) состоит из мясного
экстракта, пептона, хлорида натрия, дигидрофосфата натрия и агар-
агара.
Вариант № 1
Навеску сухого полусинтетического МПА, массой 1,5 г, помещают
в химический стакан, объемом 100 см
3
, и растворяют в 50 см
3
дистилли-
рованной воды. Химический стакан помещают на электрическую плит-
ку и доводят среду до кипения, постоянно перемешивая стеклянной па-
лочкой. Питательную среду, не охлаждая, осторожно через воронку раз-
ливают в четыре пробирки. При этом среда не должна попадать на
верхнюю часть пробирки. Пробирки закрывают ватно-марлевыми проб-
ками, оборачивают пергаментом и стерилизуют в автоклаве при 121 ºС в
течение 15 мин.
Вариант № 2
Навески пептона мясного ферментативного 0,5 г и агар-агар мик-
робиологического 0,75 г помещают в химический стакан, объемом
100 см
3
, и растворяют в 50 см
3
дистиллированной воды. Химический
стакан помещают на электрическую плитку и доводят среду до кипения,
постоянно перемешивая стеклянной палочкой. Питательную среду, не
охлаждая, осторожно через воронку разливают в четыре пробирки. При
16
этом среда не должна попадать на верхнюю часть пробирки. Пробирки
закрывают ватно-марлевыми пробками, оборачивают пергаментом и
стерилизуют в автоклаве при 121 ºС в течение 15 мин.
После автоклавирования, пробирки с расплавленной питательной
средой МПА (50–55 ºС) переносят в ламинарный бокс и разливают в
стерильные чашки Петри.
Заполненные чашки Петри с питательной средой МПА остужают,
вращая чашку по столу. Затем чашку этикетируют (на крышке маркером
указывают дату, название питательной среды, фамилию исследователя)
и перевернутыми помещают в инкубатор-термостат. Инкубацию прово-
дят в термостате при 37 ºС в течение 48 часов. После выдерживания ча-
шек их можно использовать для культивирования микроорганизмов во-
ды, почвы, воздуха.
Достарыңызбен бөлісу: |