6.4 Лабораторная работа Обнаружение каталазы крови. Открытие пероксидазы
Исследуемый материал и реактивы 1. Кровь. 2. Спирт. 3. Вата. 4. Скарификатор. 5. Перекись водорода (3%).
Ход работы Взятие крови. Кровь для клинического анализа берут обычно после укола скарификатором в мякоть пальца. Перед взятием крови мякоть пальца должна быть высушена и обезжирена. Для этого кожу протирают спиртом и вытирают насухо стерилизованной марлей или ватным тампоном (см. Приложение).
Укол не должен быть слишком поверхностным: от того, как нанесен укол, зависит интенсивность и длительность кровотечения. Первую выступившую каплю крови стирают и дают появиться второй. Выдавливать кровь их пальца не рекомендуется.
В пробирку вносят 10-15 капель 3% Н2О2 и 1 каплю крови. Отмечают бурное выделение пузырьков кислорода и пена заполняет всю пробирку.
Указания к оформлению лабораторной работы В тетради для лабораторных работ запишите принцип метода, реакцию, катализируемую каталазой крови, ход работы, зарисуйте полученные результаты и сделайте выводы.
Открытие пероксидазы Исследуемый материал и реактивы 1. Кровь. 2. Спирт. 3. Вата. 4. Скарификатор. 5. Раствор бензидина в ледяной уксусной кислоте (1%). 6. Перекись водорода (3%). 7. Вода.
Ход работы В две пробирки наливают по 5 капель 1% раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте и по 5 капель 3% раствора перекиси водорода. В первую пробирку добавляют 5 капель крови, во вторую – 5 капель воды. Наблюдают за изменением окраски.
Указания к оформлению лабораторной работы В тетради для лабораторных работ запишите принцип метода, ход работы, зарисуйте полученные результаты (окраска проб) и сделайте выводы.
6.5 Лабораторная работа Получение тирозиназы и окисление тирозина в присутствии кислорода Исследуемый материал и реактивы 1. Клубень сырого картофеля. 2. Вода. 3. Раствор тирозина (0,1%) или раствор адреналина (0,1%). 4. Марля.
Ход работы А. Получение тирозиназы из картофеля. 1г картофеля растирают в ступке с 3 мл воды и процеживают через двойной слой марли.
Б. Окисление тирозина кислородом воздуха в присутствии тирозиназы. В две пробирки наливают по 1 мл вытяжки из картофеля, содержащей фермент тирозиназу. Содержимое одной пробирки кипятят 1-2 мин и охлаждают в стакане с холодной водой. В обе пробирки добавляют по 5-10 капель 0,1% раствора тирозина, перемешивают и обе пробирки помещают в баню при 40-450С. Каждые 5 мин пробирки вынимают и содержимое их сильно встряхивают. Жидкость в пробирке с активной вытяжкой постепенно принимает сначала розовую, затем бурую и черную окраску. В контрольной пробе с прокипяченной вытяжкой цвет жидкости не изменяется.
Аналогичную работу можно проделать, взяв вместо тирозина 0,1% раствор адреналина.
