Микробиология
жүктеу/скачать 5,08 Mb. Pdf көрінісі
|
BulashevAK BMB.pdf
- Бұл бет үшін навигация:
- ПРЕЦИПИТАЦИЯ РЕАКЦИЯСЫ
- Сақиналы преципитация реакциясы.
| Бақылау сұрақтары:
1 Гемагглютинация реакциясының (ГАР) негізгі принципі. 2 Гемагглютинация реакциясының тҥрлері. 3. ЖГАР және ГАТР-ның қойылым жолдары мен реакция нәтижелерін есепке алу. ПРЕЦИПИТАЦИЯ РЕАКЦИЯСЫ Преципитация реакциясы (ПР) моножҥйелі тікелей реакцияға жатады. Преципитация реакциясында ерігіш антигендер, қайнату арқылы ӛлтірілген ӛсінді сҥзінділері немесе зерттеуге алынған материалдардың экстракттары (былғары шикізаты, ет, патологиялық материалдар және т.б.) қолданылады. Антиген (преципитиноген) мен антиденені (преципитин) бір-біріне қосқанда тҥтіктің тҥбіне баяу шӛгетін, анық кӛрінетін агрегат (лайлану, ҥлпектер) бӛлшектері пайда болады. Пайда болған тҧнбаны преципитат деп атайды. Антигендер – преципитиногендер қыздыруға (қайнауға, автоклавқа) және шіруге тӛзімді болып келеді. Оларды талқандалған ҧлпалардан, бактериялардан экстракциялау арқылы бӛліп алады. ПР сҧйық ортада арнайы тҥтіктерде немесе тығыз агарлы ортасы бар зат шынысында және Петри табақшаларында (диффузды приципитация) жҥргізіледі. Сақиналы преципитация реакциясы. Бҧл реакция топалаң балауында кеңінен қолданылады. Уленгут тҥтігіне (диаметрі 4 мм) Пастер тҥтігімен телімді преципитирлеуші қан сарысуын қҧйып, оның ҥстіне 0,3-0,4 мл антигенді ҥлестіреміз. Реакцияны қою барысында тҥтікке алдымен қан сарысуын, сосын экстракт сҥзіндісін тҥтіктің қабырғасымен қан сарысуына тигізбей енгізеді. Егер алдымен тҥтікке антиген (фильтрат) енгізілсе, онда Пастер тҥтікшесімен абайлап қан сарысуын антигеннің астына қабаттайды. Реакцияның оң нәтижесі 1-2 минуттан соң қан сарсуы мен антигеннің тҧспалдасқан шекарасында ақшыл сҧр тҥсті сақинаның пайда болуымен сипатталады (39-сурет). Реакция телімділігін бақылау қан сарысуы және антиген арқылы тексереді. Қан сарысуының бақылауы: иммунды қан сарысуы қҧйылған жеке тҥтіктің біреуіне 0,1 мл физиологиялық ерітіндіні, екінші тҥтікке антиген дайындалған стерильді ортаны қҧяды, ал ҥшінші тҥтікке 0,1 мл қан сарысуы мен 0,1 мл гетерогендік антигенді қҧяды. Антигенді бақылау ҥшін 2-3 тҥтікке жануардың қалыпты қан сарысуын қҧйып, оның ҥстіне 0,1 мл антигенді енгізіп, бӛлме температурасында қалдырады да 1-2 минуттан соң реакция нәтижесін бағалайды. 109 Антигенді енгізгеннен кейін 1-2 минут аралығында преципитация сақинасы пайда болса, бақылау тҥтіктерінде преципитат пайда болмай, реакция теріс болса реакция нәтижесі «оң» деп есептеледі. Преципитация реакциясын қою барысында белгіленген талаптар сақталуы қажет, ондай талаптар сақталмаған жағдайда дҧрыс нәтижелер алынбайды. Ҥлгілерді (ет, патологиялық материалдар) тексеру және тез арада антиген алу ҥшін оларды қайнату арқылы экстракциялайды. Былғары шикізатының сынамаларын жаппай тексеру жҧмыстарын бӛлме температурасында физиологиялық ерітіндімен 18-24 сағат бойы экстракциялау әдісін (суық әдіс) қолданады. Зертханаға тҥскен барлық сынамаларды алдын-ала автоклав кӛмегімен залалсыздандырылады да, оларды ҧсақтап, кішкентай шыны сауыттарда экстракциялайды. Қайнату (ыстық) және ҧзақ (салқын) әдіспен алынған экстрактты асбесті воронка кӛмегімен сҥзеді. Экстракт мӛлдір болуы қажет және алынған антигенді (экстракт) ПР тексереді. жүктеу/скачать 5,08 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|