О книге Special for Dabl-v aka Эукариот Фрида Карловна Черкес, Лина Борисовна Богоявленская, Наталья Александровна Бельская – Микробиология



Pdf көрінісі
бет108/305
Дата20.12.2022
өлшемі14,39 Mb.
#58441
түріУчебник
1   ...   104   105   106   107   108   109   110   111   ...   305
Байланысты:
8dccb36

Реакция агглютинации на стекле. На обезжиренное предметное стекло 
наносят 2 капли специфической (адсорбированной) сыворотки и каплю 
изотонического раствора. Неадсорбированные сыворотки предварительно 
разводят в соотношении 1:5 - 1:25. Капли на стекло наносят так, чтобы между 
ними было расстояние. Восковым карандашом на стекле помечают, где какая 
капля. Культуру петлей или пипеткой тщательно растирают на стекле, а потом 
вносят в каплю изотонического раствора и в одну из капель сыворотки
размешивая в каждой до образования гомогенной взвеси. Капля сыворотки, в 
которую не внесена культура, является контролем сыворотки. 
Внимание! Нельзя переносить культуру из сыворотки в каплю 
изотонического раствора, которая является контролем антигена. 
Реакция протекает при комнатной температуре в течение 1-3 мин. Контроль 
сыворотки должен оставаться прозрачным, а в контроле антигена должна 
наблюдаться равномерная муть. Если в капле, где культура смешана с 
сывороткой, появятся хлопья агглютината на фоне прозрачной жидкости, 
результат реакции считают положительным. При отрицательном результате 
реакции в капле будет равномерная муть, как в контроле антигена. 
Реакция отчетливее видна, если ее рассматривать на темном фоне в 
проходящем свете. При ее изучении можно пользоваться лупой. 
Развернутая реакция агглютинации. Готовят последовательные, чаще 
всего двукратные разведения сыворотки. Сыворотку больного обычно 
разводят от 1:50 до 1:1600, иммунную - до титра или до половины титра. Титр 
агглютинирующей сыворотки - ее максимальное разведение, в котором она 
агглютинирует гомологичные клетки. 
Разведение сыворотки: 1) ставят в штатив нужное количество пробирок 
одинакового диаметра, высоты и конфигурации дна; 
2) на каждой пробирке указывают степень разведения сыворотки, кроме 
того, на 1-й пробирке пишут номер опыта или название антигена. На 
пробирках контролей пишут "КС" - контроль сыворотки и "КА" - контроль 
антигена; 


3) во все пробирки наливают по 1 мл изотонического раствора; 
4) в отдельной пробирке готовят исходное (рабочее) разведение сыворотки. 
Например, для приготовления рабочего разведения 1:50, в пробирку наливают 
4,9 мл изотонического раствора и 0,1 мл сыворотки. На пробирке обязательно 
указывают степень ее разведения. Исходное разведение сыворотки вносят в 
первые две пробирки и в пробирку контроля сыворотки; 
5) готовят последовательные двукратные разведения сыворотки. 
Примерная схема ее разведения приведена в табл. 16. 
 
Таблица 16. Схема разведения сыворотки для развернутой РА 
Примечание. Стрелки указывают перенос жидкости из пробирки в 
пробирку; из 5-й пробирки и пробирки контроля сыворотки 1,0 мл выливают в 
дезинфицирующий раствор. 
Внимание! Во всех пробирках должен быть одинаковый объем жидкости. 
После того как сделаны разведения сыворотки, во все пробирки, кроме 
контроля сыворотки, вносят по 1-2 капли антигена (диагностикума или 
свежеприготовленной взвеси бактерий). В пробирках при этом должна 
появиться небольшая равномерная муть. Контроль сыворотки остается 
прозрачным. 
Пробирки тщательно встряхивают и помещают в термостат (37° С). 
Предварительный учет результатов реакции производят через 2 ч, а 
окончательный - спустя 18-20 ч (выдерживая при комнатной температуре). 
Учет результатов как всегда начинают с контролей. Контроль сыворотки 
должен оставаться прозрачным, контроль антигена - равномерно мутным. 
Просматривают пробирки в проходящем свете (очень удобно на темном фоне) 
невооруженным глазом, с помощью лупы или агглютиноскопа. 




Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   104   105   106   107   108   109   110   111   ...   305




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет