Онкология. Журнал им. П. А. Герцена, 2, 2016
жүктеу/скачать 260,06 Kb. Pdf көрінісі
|
Onkologia 2016 02 064
| (табл. 3)
. При этом нативные полные вирусные частицы никогда не используются в качестве векторов, так как в этом случае есть опасность встраивания их генетического материала в клетки хозяина с целью приобретения метаболических и биосинтетических продуктов для вирусной транскрипции и репликации. Поэтому вирусы предварительно подвергаются существенной генетической модификации, при- водящей к утере их репликационной способности и повышению тропизма к тканям и клеткам. Вирусные векторы достаточно хорошо изучены, они имеют высокую эффективность трансфекции in vivo , для их наработки существуют коммерческие паковочные клеточные линии. Век- торы на основе аденовируса и аденоассоциированных вирусов не встраиваются в геном клетки, а остаются эпихромосомными. Это уменьшает опасность мутагенеза, который может быть ин- дуцирован при внедрении вируса в геном. При конструировании специфически направленных аденовирусных векторов эффек- тивной оказалась замена вирусных промоторов, контролирую- щих основные транскрипционные области, так называемыми транскрипционными регуляторами, в результате чего экспрессия гена и репликация вируса происходят преимущественно в целе- вых клетках [14, 15]. Ретровирусные векторы интегрируют в геном хозяина, что при генной терапии обеспечивает стабильность и стойкую экс- прессию трансгена в дочерних клетках, однако несет риск ин- серционного мутагенеза, который может вызывать инактивацию генов-супрессоров опухолевого роста или активации онкогенов [16]. Необходимо отметить, что вирусные векторы обладают и другими недостатками. Так, они могут нести лишь небольшое ко- личество генетического материала (до 30 кб). Кроме того, адено- вирусные векторы 1-го поколения, в которых присутствуют все вирусные гены, обладают выраженной иммуногенностью, кото- рая обусловливает развитие как клеточного, так и гуморального иммунного ответа, что приводит к разрушению не только самого вектора, но и клеток, трансдуцированных ими, и как следствие к ограничению срока экспрессии трансгена в 2—3 нед после транс- дукции [17]. В настоящее время проблема иммуногенности таких векторов для генной терапии решается путем разработки кон- струкций, практически полностью лишенных вирусных генов, так называемых «gutless» вирусов или хелперзависимых (HD)/ Ad векторов [18]. Исследования in vivo показали перспективность использования HD/Ad векторов для трансдукции клеток сосуди- стой системы и миокарда [19]. Несмотря на описанные недостатки, вирусный метод до- ставки трансгенов в клетки успешно развивается и в настоящее время является доминирующим: около 70% клинических иссле- дований посвящено изучению генетических конструкций, снаб- женных вирусными векторами. В то же время в последние годы активно разрабатываются невирусные системы доставки генетического материала с ис- пользованием высокомолекулярных химических соединений для конденсации с ДНК: липидсвязанные комплексы — липоплек- сы либо поликатионные комплексы, имитирующие поверхность вируса — полиплексы жүктеу/скачать 260,06 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|