4.
Кесінділерді, құрамы төмендегідей,
ферменттік ерітінді
қоспасына салады: 2%-тік розим HP150, 2%-тік мейцелаза,
0,03%-тік мацерозим R10 (рH 5,8), Кесінділерді осы ортада 16-17
сағат 27 С-да шайқағыш аппаратта (30 айналым/мин
жылдамдықта) инкубациялайды.
5.
Инкубациялық қоспаны пораларының диамстрі 64
мкм елеуіш
арқылы өткізіп, әрі тұқымжарнақтардың кесінділерін
жайлап сыға отырып, протопластарды бөліп алады.
6.
Қоспаны 120g жылдамдықта 10 мин центрифугалау арқылы
протопластарды бөліп алады да, 3 қайтара ПШО 13М ортасымен
шаяды.
7.
Тіршілікке қабілетті протопластарды анықтайды. Ол үшін
протопластарды мстил көгімсн (0,02-0,1%) бояйды.
Тек өлі
клеткалар ғана боялады.
8 тарау бойынша бақылау сұрақтары
1. Соматикалық будандастыру деген не?
2. Протопластарды бөліп алудың қандай әдістері бар?
3. Протопластарды жасанды жағдайда қалай өсіруге болады?
4. Протопластардың тіршілікке қабілеттілігін аныктау.