Решением Учебно-методического совета фгбоу дпо рманпо минздрава России «28» ноября 2016г
жүктеу/скачать 4,09 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Сравнительная характеристика фотометрических методов.
| Иммунохемилюминисценция. Хемилюминесценция – испускание
света молекулами, перешедшими в возбужденное состояние в результате химической реакции. Чаще всего данное явление наблюдается при окислении органических веществ перекисью водорода, гипохлоритом, молекулярным кислородом. В люминометрах характерной особенностью является отсутствие источника света, свечение образца индуцируется химической реакцией. Принцип хемилюминесцентной детекции реализуется в вариантах методик иммунохимических исследований. Хемилюминесцентная детекция обладает высокой специфичностью, не требует длительных инкубаций или добавления стоп реагента, не использует дополнительные источники света. Хемилюминесценция в настоящее время активно используется в КДЛ и научной практике для обнаружения минимальных количеств аналитов в биопробах. В состав реакционной смеси при реакции иммунохемилюминесценции (ИХЛ) входят: меченые антитела или антигены и смесь: хемилюминесцентный субстрат, перекись водорода и усилители реакции. В качестве последних применяются ароматические амины, нафтолы, фенолы. Иммунохимические анализаторы, разработанные для регистрации ИХЛ, обладают высокой производительностью и способностью проводить анализ в автоматическом режиме. К несомненным достоинствам иммунохемилюминесцентного метода отнесятся: Высокая автоматизация и стандартизация аналитического процесса. Высокая аналитическая чувствительность и специфичность. Длительная стабильность реагентов. Возможность исследования единичных проб. 126 Сравнительная характеристика фотометрических методов. В клинической химии достаточно часто встает вопрос о выборе технологии для определения той или иной группы аналитов. Например, определение гормонов можно проводить методом абсорционной фотометрии по технологии ИФА-анализа, можно турбидиметрией и нефелометрией, можно воспользоваться технологиями, основанными на использовании флюоресцентной или люминесцентной метки. Основным недостатком абсорбционной фотометрии является относительно узкий линейный диапазон измерения результатов. Даже лучшие фотометры позволяют регистрировать изменения аналитов (гормонов) не более, чем в пределах 4 десятичных порядков. Флюоресцентные и люминесцентные технологии увеличивают линейный диапазон до 6-8 десятичных порядков, то есть позволяют работать без разведения. В табл. 2.2 представлены сравнительные данные о чувствительности фотометрических, флуоресцентных и люминесцентных методов определения гормонов (и других аналитов). Флуоресцентные и люминесцентные технологии позволяют существенно увеличить чувствительность определения веществ в биопробах, однако они используются, как правило, в закрытых технологиях, включающих прибор- реактивы-калибраторы-контрольные материалы. Аналитические характеристики, такие как линейный диапазон и чувствительность, определили, что методы абсорбционной фотометрии, реализованные на биохимических анализаторах, применяются в основном как скрининговые диагностические технологии, выявляющие системную патологию. Иммунохимические методы, основанные на специфическом взаимодействии антитело-антиген, используются для выявления или количественного определения конкретных маркеров, которые могут указать на наличие определенного заболевания или патологии. Качественные иммунохимические методы, реализованные технологией ИФА-анализа, чаще применяются при диагностике инфекционных заболеваний, при котором важен ответ на вопрос «есть или нет» заражение, «есть или нет» иммунитет к 127 конкретному инфекционному агенту. Количественные иммунохимические методы используются для определения концентрации индивидуальных молекул, что позволяет оценить степень патологии, следить за эффективностью терапии, констатировать излечение. В случаях повышения метки, характеризующей патологию, эффективны менее чувствительные иммунохимические технологии: иммунотурбидиметрия, нефелометрия. Если же количество метки снижается или требуется получить воспроизводимый результат в отдаленный период, то предпочтительно использовать иммунохемилюминесцентные технологии. Таблица 2.2 жүктеу/скачать 4,09 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|