Решением Учебно-методического совета фгбоу дпо рманпо минздрава России «28» ноября 2016г
жүктеу/скачать 4,09 Mb. Pdf көрінісі
|
| Высокотехнологические
гематологические анализаторы. Высокотехнологические гематологические анализаторы способны осуществлять дифференцированный счет лейкоцитов по 5-ти (5Diff) основным популяциям, используя различные принципы дифференцирования клеток: нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и лимфоциты, 149 оценивать наличие незрелых гранулоцитов, анализировать ретикулоциты и их субпопуляции, проводить оценку стволовых гемопоэтических клеток и субпопуляций лимфоцитов. Многочисленные функции гематологических анализаторов стали возможны, благодаря развитию новых технологий. В каждом случае в этой группе анализаторов применяется не менее 3 разных технологий, комбинированный результат которых дает возможность дифференцировать лейкоциты. Технология VCS включает одновременный компьютерный анализ клеток по объему, электропроводности и дисперсии лазерного света. Полученные по трем каналам данные с помощью электроники комбинируются и анализируются, в результате происходит распределение клеток по дифференцировочным кластерам и, таким образом, лейкоциты разделяются на пять основных популяций: лимфоциты, моноциты, нейтрофилы, эозинофилы и базофилы (рис. 2.18). Результатом отображения объемного графика на плоскости является лейкоцитарная скатерограмма, на которой каждый тип клеток имеет свою зону расположения. Рис.2.18. VCS-куб, определяющий лейкоцитарную скатерограмму. Клеточные кластеры размещаются на цветной объемной диаграмме, где по оси Х – нормированная рассеивающая способность, по оси Y – объем клеток, по оси Z – структурная электропроводимость 150 Технология MAPSS – Multi Angle Polarized Scatter Separation – мультипараметрическая система лазерного светорассеивания – регистрация интенсивности рассеивания клетками поляризованного лазерного луча под разными углами. Этот метод заключается в компьютерном анализе дисперсии лазерного счета клетками крови. Рассеивание клеткой поляризованного лазерного луча под разными углами дает сведения о таких ее свойствах, как: размер клеток – для чего оценивается прохождение поляризованного лазерного луча под малым углом рассеивания, структура и степень сложности клеток – оценивается по анализу рассеивания поляризованных лазерных лучей, направленных под углом до 7 о , ядерно-цитоплазматическое соотношение - оценивается по анализу рассеивания поляризованных лазерных лучей, направленных под углом до 10 о , оценка формы клеточного ядра – осуществляется благодаря анализу светорассеивания поляризованных лазерных лучей под углом 90 о , для оценки клеточной зернистости и дифференцировки эозинофилов используется оценка светорассеивания деполяризованного луча под углом в 90 о . Принцип жидкостной цитохимии (измерение активности пероксидазы в лейкоцитах), в сочетании с методами кондуктометрии, гидродинамического фокусирования, оптической абсорбции, позволяет проводить дифференцировку лейкоцитов. Использование пероксидазной реакции основано на различной ее активности в лейкоцитах. Так, эозинофилы и нейтрофилы имеют интенсивную пероксидазную активность, моноциты – слабую, в лимфоцитах она не выявляется. Проточная цитохимическая техника включает регистрацию рассеянного и поглощенного светового луча. В лейкоцитарном канале после лизиса эритроцитов и стабилизации лейкоцитов происходит цитохимическая 151 реакция, далее лейкоциты дифференцируются по двум признакам: размеру клеток, определяемому методом рассеивания лазерного луча, и пероксидазной активности – по поглощению клеткой светового потока. Дифференцировка базофилов от других гранулоцитов проводится в базо- канале. Цитоплазма всех лейкоцитов за исключением базофилов подвергается лизису после обработки пробы специфическим лизатом. Проточная цитофлюориметрия с использованием флуоресцентного красителя полиметина, который связывается с ДНК и РНК клеток, позволяет использовать его для дифференцировки лейкоцитов и для подсчета ретикулоцитов. Анализ клеток происходит в проточной кювете при пересечении луча лазера. После контакта лазерного луча с окрашенной клеткой происходит рассеивание последнего под большим и малым углами и возбуждение флуоресцентного красителя. Гематологические анализаторы с полным дифференцированным подсчетом лейкоцитов позволяют с высокой точностью дифференцировать лейкоциты, провести скрининг нормы и патологии, динамический контроль за лейкоцитарной формулой и резко сократить ручной подсчет лейкоцитарной формулы. жүктеу/скачать 4,09 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|