С курсом факультета повышения квалификации и переподготовки кадров



Pdf көрінісі
бет294/375
Дата31.12.2021
өлшемі2,61 Mb.
#21760
1   ...   290   291   292   293   294   295   296   297   ...   375
Байланысты:
Farmatsevticheskaia biotekhnologiia Moiseev-DV 2020

Удаление  клеточных  протеаз,  которые  способны  разрушить 
целевые 
ферменты, 
осуществляют 
обработкой 
ингибиторами-
комплексонами  (ЭДТА,  о-фенантролином,  оксихинолином),  солями  ртути 
или  серебра.  Также  протеазы  удаляют  при  помощи  аффинной 
хроматографии. Если фермент термостабилен, а протеазы термолабильны, 
то последние удаляют нагреванием. 
Удаление нуклеиновых кислот. Для осаждения нуклеиновых кислот 
в  виде  комплексов  используют  бромистый  цетилтриметиламмоний, 
стрептомицинсульфат,  протаминосульфат,  полиэтиленимин.  Полнота 
осаждения зависит от рН, ионной силы, концентрации осадителя и белка. 
Также  нуклеиновые  кислоты  удаляют  путем  их  гидролиза  нуклеазами 
(панкреатические ДНК-аза и РНК-аза). 
Широко используют метод фракционирования белков нейтральными 
солями  или  органическими  растворителями.  Соль  (аммония  сульфат), 
растворяясь,  связывает  воду,  в  результате  изменяется  степень  гидратации 
молекул  белка,  что  приводит  к  их  агрегации  и  образованию  осадка. 
Аммония сульфат стабилизирует многие ферменты. 
При  смешивании  с  водой  органического  растворителя  (этанола, 
ацетона)  изменяется  ее  диэлектрическая  константа  и  происходит  замена 
молекул  воды  на  молекулы  растворителя,  в  результате  ускоряется 
образование  нерастворимых  белковых  агрегатов.  Эти  операции  проводят 
при  температуре  не  выше  –  10ºС,  используя  охлажденные  сухим  льдом 



Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   290   291   292   293   294   295   296   297   ...   375




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет