Интеграциялау интеграция фармацевтической науки, образования и практики на современном этапе

Вестник КазНМУ, №5 – 2014
 
www.kaznmu.kz
 
 
 
 
53 
 
 
 
Результаты  и  их  обсуждение.  Проведенный 
фитохимический 
анализ 
столон 
цистанхе 
солончаковой  показал  наличие  в  ней  комплекса 
биологически  активных  соединений:  полисахаридов, 
иридоидов, 
флавоноидов 
(рутин, 
кверцетин, 
лютеолин,  мирицетин)  и  др.  классов  веществ. 
Изучение микроэлементного состава сырья, показало, 
что 
столон 
Цистанхе 
солончаковой 
можно 
определить как безопасное и экологическое чистое. 
Выводы. Несмотря на проведенные  многочисленные 
исследования 
цистанхе 
солончаковой 
 
на 
фармацевтическом  рынке  Казахстана  отсутствует 
доступная  и  рациональная  лекарственная  форма    на 
основе  его  экстракта.  Поэтому,  получение  гранул 
Цистанхе  солончаковой  является      одной  из  задач 
фармацевтической промышлености. 
 
 
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ: 
1
 
Капсалямова  Э.Н.,  Датхаев  У.М.,  Сакипова  З.Б.,  Картбаева  Э.Б.  Цистанхе  солончаковая  как  перспективный 
источник биологически активных веществ для разработки новых лекарственных препаратов // Материалы научно-
практической  конференции  по  итогам  выполнения  научно-технических  программ  «Разработка  новых 
лекарственных средств, вспомогательных веществ, методов и технологий их получения на основе отечественного 
сырья»  и  «Разработка  состава  и  технология  лекарственных  форм,  обладаящих  противовоспалительных  и 
антимикробным действием на основе пихтового масла». – Алматы, 2012. – С. 29-34. 
2
 
Картбаева  Э.Б.  Стандартизация  биологической  активной  добавки  из  CistancheSalsa  и  определение  ее 
безопасности  //  Материалы  научно-практической  конференции  «Актуальные  вопросы  образования,  науки  и 
производства в фармации». – Ташкент, 2013. – С. 42-44.  
3
 
Адекенов  С.М.  Химическое  изучение  растительного  сырья  Казахстана-источника  фитопрепаратов  // 
Разработка и внедрение новых лекарственных средств и организационных форм фармацевтической деятельности: 
сб.науч. тр. - Томск, 2000. - С. 63.  
4
 
Капсалямова  Э.Н.  Разработка  состава  и  технологии  лекарственной  формы  на  основе  полифенольных 
соединений Cistanche salsa (С.А.Mey.) G. Beck // Автореф…дисс. канд. фарм. наук. - Караганда, 2010. – 22 с.  
5
 
Сакипова З.Б. Государственное регулирование и стандартизация качества лекарственных средств в Республике 
Казахстан  //  Печатные  материалы  международной  научно-практической  конференции  «Значение  и  роль 
стандартизации в управлении здравоохранением». - Астана, 2008. - С. 99-101.  
6
 
Дильбарханов Р.Д., Капсалямова Э.Н. Современный подход к изучению и созданию фитопрепаратов. 1-e изд.  - 
Харьков: Омега-Л, 2008. - 138 с. 
 
 
У.М. ДАТХАЕВ, Э.Н. КАПСАЛЯМОВА, М.Д. БУХАНБАЕВА  
С.Ж. Асфендияров атындағы Қазақ Ұлттық Медицина Университеті, 
«Фармацевт-технолог» модулі 
 
СОРТАҢДЫ СҰҢҒЫЛА ГРАНУЛА АЛУДАҒЫ ПЕРСПЕКТИВАЛЫ ШИКІЗАТ КӨЗІ РЕТІНДЕ 
 
Түйін: Мақалада сортаңды сұңғыланың өсу аймақтары, хиялық құрамы және құрамындағы биологиялық белсенді 
заттары гранула алуға негізделгені баяндалған. 
Түйінді сөздер: Сортаңды сұңғыла, гранула, биологиялық белсенді заттар, Қазақстан өсімдіктері. 
 
 
U.M. DATKHAEV, E.N. KAPSALYAMOVA, M.D. BUKHANBAYEVA 
Asfendiyarov Kazakh National Medical University, 
«Pharmasyst-tehnolog» module 
 
CISTANCHE SALSA AS A PROMISING SOURCE WHEN OBTAINED GRANULES 
 
Resume. The article presents data on the place of growth, the chemical composition of Cistanche salsa and the maintenance 
of the amount of biologically active substances obtaining granules is reasonable. 
Keywords: Cistanche salsa, granule, biologically active substances, plant in Kazakhstan. 
 
 

Вестник КазНМУ, №5 – 2014
 
www.kaznmu.kz
 
 
 
 
54 
 
 
 
УДК 543.421/422:615.322 
 
О.А. ЕВТИФЕЕВА, Н.Н. СМЕЛОВА, У.М. ДАТХАЕВ, К.И. ПРОСКУРИНА  
Национальный фармацевтический университет,  
Кафедра аналитической химии, г. Харьков, Украина 
Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова,  
г. Алматы, Республика Казахстан 
 
ОЦЕНКА МЕТРОЛОГИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК МЕТОДИКИ СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО  
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНУЛИНА 
 
В  данной  статье  приведена  актуальность  использования  инулина  в  современной  медицине.  Из  перечисленных 
методов  определения  количественного  содержания  полифруктозана  описывается  методика,  основанная  на 
кислотном  гидролизе  инулина  с  соляной  кислотой  на  водяной  бане  с  образованием  продукта  трансформации 
фруктозы  –  5-гидроксиметилфурфурола  с  дальнейшим  спектрофотометрическим  определением.  Проведена 
оценка  основных  метрологических  характеристик  методики  спектрофотометрического  количественного 
определения методом удельного показателя поглощения.  
Ключевые слова: инулин, фруктоза, 5-гидроксиметилфурфурол, спектрофотометрическое определение. 
 
Актуальность проблемы 
На  сегодняшнее  время  широкого  распространения 
среди  населения  всего  мира  занимают  такие 
заболевания,  как  сахарный  диабет,  атеросклероз, 
алиментарное  ожирение.  Для  профилактики  и 
лечения  данных  заболеваний  в  медицине  активно 
используют углеводные полимеры – полифруктаны, в 
частности  инулин  [1].  Кроме  влияния  на  обмен 
веществ,  он  способствует  выведению  из  организма 
солей  тяжелых  металлов,  принимает  участие  в 
усвоении  кальция,  железа.  По  данным  некоторых 
источников,  у  γ-инулина  были  выявлены  также 
иммуномодулирующие свойства [2].  
 
Введение 
Инулин  –  резервный  полисахарид  некоторых  видов 
растений и бактерий [3]. Он представляет собой смесь 
олиго-  и  полисахаридов  фруктозана.  Растительный 
инулин 
характеризуется 
средней 
степенью 
полимеризации,  и,  как  правило,  состоит  из  10-60 
молекул  фруктозы  и  одной  терминальной  молекулы 
глюкозы [4].  
В  настоящее  время  ни  один  из  существующих 
методов 
анализа 
не 
позволяет 
определить 
достоверный качественный состав всех компонентов 
инулина. 
Необходима 
комбинация 
различных 
методов  исследования  для  установления  структуры 
нативного  инулина.  С  этой  целью  широко 
используются  совокупность  таких  методов  анализа, 
как  высокоэффективная  жидкостная  хроматография 
[5], 
хромато-масс-спектрометрия, 
высокоэффективная анионообменная хроматография 
с импульсным амперометрическим детектированием 
[6]. Для рутинного анализа и количественной оценки 
содержания  инулина  в  лекарственном  растительном 
сырье 
(ЛРС) 
широко 
используют 
метод 
спектрофотомерии  в  разных  вариантах:  метод 
стандарта,  удельного  показателя  поглощения  и 
фотоколориметрирования  окрашенных  продуктов 
реакции инулина с различными реагентами [7, 8].  
 
Целью 
нашей 
работы 
является 
оценка 
метрологических 
характеристик 
методики 
количественного  определения  инулина  методом 
прямой  спектрофотомерии  для  установления  её 
возможности использования при анализе вытяжек из 
ЛРС.  
При  анализе  в  сложных  природных  матрицах 
наиболее  применяемыми  методами  количественной 
оценки 
содержания 
инулина 
являются 
ферментативный 
и 
кислотный 
способы 
его 
гидролиза 
с 
образованием 
фруктозы 
и 
количественное 
определение 
последней 
[9]. 
Определению  не  мешают  присутствующие  в  смеси 
другие  полисахариды,  типа  амилозы,  маннанов, 
ксиланов или арабинанов [10]. 
 
Материалы и методы 
Экспериментальные  исследования  проводили  с 
использованием  субстанции  инулина  №  A18425 
(количественное  содержание  98%)  номер  партии 
H5597. 
Спектрофотометрические 
определения 
проводили  на  спектрофотометре  Specord  200.  В  ходе 
работы использовали весы аналитические АВ 204 S/A 
Mettler  Toledo,  мерную  посуду  класса  А,  реактивы, 
которые  отвечают  требованиям  Государственной 
Фармакопеи Украины.  
Для 
анализа 
была 
выбрана 
методика 
количественного  определения  инулина,  основанная 
на  его  способности  при  нагревании  с  5%  раствором 
хлористоводородной  кислоты  в  течение  2,5  ч 
образовывать продукт трансформации фруктозы – 5-
гидроксиметилфурфурол,  который  имеет  максимум 
поглощения в области 285 нм (рисунок 1).  
Расчет  содержания  суммы  фруктозанов  проводили  с 
использованием  удельного  показателя  поглощения 
5-гидроксиметилфурфурола, который равен 298 [7]. 
Поскольку 
отечественная 
нормативная 
документация на субстанцию инулина отсутствует, с 
целью 
оценки 
результатов 
количественного 
определения  инулина  использовали  зарубежный 
стандарт  Official  Monographs  “Inulin”  (The  US 
Pharmacopoeia,  XXII),  согласно  которому  содержание 
фруктозы в инулине должно быть не менее 94% и не 
более 102%, рассчитанного на сухой препарат. Таким 
образом,  при  расчете  критериев  валидационных 
характеристик  методики  анализа  использовали 
регламентированное  АНД  содержание  и  допуски 
содержания 98±4,0%. 

Вестник КазНМУ, №5 – 2014
 
www.kaznmu.kz
 
 
 
 
55 
 
 
 
 
 
Рисунок 1 - Спектр поглощения исследуемого раствора инулина после кислотного гидролиза 
 
Основной целью валидации аналитической методики 
является 
доказательство 
на 
основе 
экспериментальных  данных  того,  что  методика 
пригодна 
или 
непригодна 
для 
решения 
предполагаемых 
задач. 
Валидация 
методики  
обязательно  предполагает  оценку  полученных 
валидационных  характеристик    по  отношению  к 
критериям  приемлемости.  Поэтому  нами  были 
рассчитаны  критерии  приемлемости  с  учетом 
регламентируемых  допусков  содержания  инулина  в 
субстанции 
и 
особенностей 
метода 
спектрофотометрии 
в 
варианте 
показателя 
поглощения (таблица 1) [11,12]. 
 
Таблица    1  -  Критические  значения  систематической  погрешности  (max  δ
tot
),  полной  неопределенности  анализа 
(maxΔ
As
) и параметров линейной зависимости Y
i
 = b•X
i
 + a для тестируемой методики* 
 
субстанция 
λ нм 
%
1
1cm
A
 
С
nom
мг/ 
100мл 
А
ном
 
maxΔ
As
% 
maxδ
tot
 = 
maxΔ
prec
% 
RSD
o
 
% 
min R
2c
 
maxa % 
maxδ
А
%
 
Инулин 
285 
298 
1,960 
0,584 
4.0 
2.84 
1.2 
0.9964 
5.5 
2,42 
*  g = 5 точек, допуск содержания 94-102%  (В=±4,0%), диапазон применения 80-120%. 
 
Поскольку  процедура  пробоподготовки  включает 
проведение  кислотного  гидролиза  инулина  с 
образованием 
5-гидроксиметилфурфурола, 
необходимо  было  определить  оптимальное  время 
спектрофотометрирования  исследуемого  раствора. 
Исследование  стабильности  исследуемого  раствора 
проводили  на  протяжении  часа,  определяя  через 
каждые  15  минут  оптическую  плотность  раствора 
(таблица 2). 
 
Таблица 2 - Результаты исследования стабильности исследуемого раствора 
 
Исследуемый 
раствор 
Время исследования стабильности n
t
, мин. 
C
r
,
t
 
S
r
,
t
 
RSD
t
,
% 
Δ
t
,% 
maxδ
t
ot
 
0 
15 
30 
45 
60 
А
i
 
0,9313 
0,9272 
0,9230 
0,9259 
0,9267 
77,75 
0,28 
0,36 
0.78 
2.8 
0,9313 
0,9269 
0,9214 
0,9267 
0,9279 
0,9313 
0,9271 
0,9212 
0,9261 
0,9279 
А
ср.
 
0,9313 
0,9271 
0,9219 
0,9262 
0,9275 
1
0,1
298
25
100
A
Х
i





,% 
78,13 
77,77 
77,34 
77,70 
77,81 
 
0.0000
0.2500
0.5000
0.7500
260.0
270.0
280.0
290.0
300.0
310.0
320.0
330.0
340.0
285.0nm, 0.9313A
Absorbance
A
nm

Вестник КазНМУ, №5 – 2014
 
www.kaznmu.kz
 
 
 
 
56 
 
 
 
Обсуждение результатов 
В  ходе  эксперимента  было  установлено,  что  неопределенность  оптической  плотности  аналитического  раствора 
составляет  Δt=0,78%,  и  значимо  не  влияет  на  результаты  анализа  (Δt=0,78%≤2,8%=maxδ
tot
).  Определение  лучше 
проводить через 30 минут после получения растворов.  
Определение  параметров  линейности  методики  проводили  в  диапазоне  концентраций  от  3.2∙10
-5
  до  4.8∙10
-5
  г/мл 
согласно  стандартизованyой  процедуре  [13].  Линейная  зависимость  описывается  уравнением  Y=0,7581x+0,0002  и 
характеризуется  величинами  s
b
=0,018,  s
a
=0,0007,  s
r
=0,0002≤1,00=RSD
0
,  s
r
/b=0,0003  (отношение  остаточного 
стандартного  отклонения  прямой  к  угловому  коэффициенту),  r
2
=0,9983≥0,9848=R
c
  (коэффициент  корреляции) 
(Рисунок 2). 
 
 
Рисунок 2 - График линейной зависимости при прямом спектрофотометрическом определении инулина 
 
Определение  правильности  и  сходимости  методики  проводили,  используя  для  оценки  результаты  линейности 
(таблица 3).  
 
Таблица  3  -  Результаты  статистической  оценки  метрологических  характеристик  методики  количественного 
определения инулина методом спектрофотомерии 
 
№ раст-
вора 
Введено в % к концентрации 
раствора сравнения 
X
i
 =(C
i
 /C
nom
)∙100% 
Найдено в % к концентрации раствора 
сравнения 
Y
i
 =(A
i*
 /A
nom
)∙100% 
Найдено в % к 
введенному 
Z = (Y
i
/X
i
)100% 
1 
80,00 
61,10 
76,38 
2 
90,00 
68,40 
76,00 
3 
100,00 
78,13 
78,13 
4 
110,00 
84,04 
76,40 
5 
120,00 
93,34 
77,79 
Среднее, Х% 
76,94 
Относительное стандартное отклонение, RSD
х
% 
0,89 
Относительный доверительный интервал  
preg
% = t(95%,4)∙RSD
x
 = 2.13∙RSD
x
 
1.90 
Критическое значение сходимости результатов  
preg
≤ 2.8% 
Соотв. 
Систематическая погрешность 
- 100│ 
21.06 
Критерий приемлемости систематической погрешности 
х
= 0.63/3 = 0.21
 если не выполняется 1), то 2) 
max
tot
 
Не соотв. 
Вывод о методике 
Не корректна 
 
 
 
0,030
0,035
0,040
0,045
0,050
0,024
0,026
0,028
0,030
0,032
0,034
0,036
0,038
Linear Regression f or Data1_B:
Y = A + B * X
Param      Value      sd
A          0,00016    0,00073
B          0,76       0,01803;
SD = 0,00023,  N = 5
R  = 0,99916
P = 0,00003
                  График линейной зависимости при 
прямом спектрофотометрическом определении инулина
Y
 Н
ай
де
но
 в
 г
/м
л
X Введено в г/мл

Вестник КазНМУ, №5 – 2014
 
www.kaznmu.kz
 
 
 
 
57 
 
 
 
Выводы 
В  ходе  проверки  метрологических  показателей  при 
количественном  определении  инулина,  пришли  к 
выводу,  что  приведенная  методика  не  корректна, 
имеет  большое  значение  погрешности.  Согласно 
методике,  содержание  инулина  в  пересчете  на 
фруктозу 
составляет 
76,94 
%, 
стандартное 
отклонение 
- 
0,89 
% 
и 
относительный 
доверительный интервал - 1,90 %. 
Заниженные  результаты  анализа  инулинового 
порошка, на наш взгляд, можно пояснить побочными 
процессами образования гуминовых веществ, а также 
регидратацией 
5-гидроксиметилфурфурола 
в 
левулиновую  и  муравьиную  кислоты,  которые 
относятся к весьма слабо поглощающим соединениям 
в  ультрафиолетовой  области  спектра  (и  то  лишь  в 
коротковолновой  области,  менее  200  нм).  В  ходе 
исследования  мы  также  пришли  к  выводу,  что  на 
эффективность 
получения 
5-
гидроксиметилфурфурола  существенное  влияние 
оказывает  также  температура  и  время  проведения 
кислотного 
гидролиза, 
активность 
воды 
и 
концентрация инулина.  
Однако,  не  смотря  на  заниженные  результаты 
эксперимента,  приведенная  методика  удобна  в 
использовании  при  рутинном  анализе,  т.к.  расчет 
производится  не  по  методу  стандарта  (стандарты 
инулина  различны  в  зависимости  от  источника 
получения),  а  методом  удельного  показателя 
поглощения.  К  тому  же,  методика  предусматривает 
пересчет  основного  вещества  на  фруктозу,  которая 
представляется  собой  соединение  с  фиксированным 
составом.  
Для  использования  анализируемой  методики  в 
рутинном анализе необходима оптимизация условий 
проведения  эксперимента  (в  частности  времени 
гидролиза)  с  целью  повышения  точности  и/или  же 
введение коэффициента пересчета (для учета потери 
вещества при гидролизе). 

жүктеу/скачать 6,39 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: