Кумарины и хромоны. Дубильные вещества. Особенности химической структуры, классификация, физико-химические свойства, пути использования
жүктеу/скачать 0,72 Mb.
|
Лекция 3
| Анализ кумаринов.
Производные кумаринов обладают способностью флуоресцировать в фильтрованном УФ-свете. По характеру флуоресценции различают фитокумарины и простые кумарины. Один из методов обнаружения кумаринов в лекарственном растительном сырье является микровозгонка. При нагревании растительного сырья до 1000 С некоторые кумарины возгоняются в виде игольчатых кристаллов. Растительное сырье измельчают до размера частиц, проходящих через сито с отверстиями диаметром 3 мм. 3 г сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 30 мл 95 %-ного спирта и нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 20 мин. Извлечение фильтруют в горячем виде и к фильтрату добавляют по каплям при постоянном перемешивании 10 %-ный раствор свинца ацетата. При этом большая часть веществ фенольного характера, обладающая способностью к азосочетанию, осаждается. Горячий фильтрат переносят на бумажный фильтр, отделяют осадок солей свинца и промывают остаток 3 мл спирта. К охлажденному фильтрату прибавляют 5 мл воды. Для дальнейшей очистки фильтрат помещают в делительную воронку вместимостью 100 мл, добавляют 20 мл хлороформа и встряхивают. Отделяют нижний хлороформный слой, хлороформ отгоняют под вакуумом, а остаток в колбе растворяют в 6 мл 95 %-ного спирта. Этот раствор используют для дальнейшего исследования. 1. Лактонная проба. Особенностью кумаринов как лактонных соединений является их специфическое отношение к щелочам. Кумарины под воздействием щелочей образуют желтый раствор солей кумариновой кислоты (кумаринаты). При подкислении щелочных растворов цис-ортогидроксикоричная( кумариновая) кислота циклизуется с образованием кумарина. 2 мл из полученного извлечения добавляют в пробирку и прибавляют 5 капель 10 %-ного спиртового раствора калия гидроксида, нагревают на во- дяной бане в течение 5 мин (при наличии кумаринов раствор желтеет). Содержимое пробирки охлаждают, добавляют 2 мл очищенной воды, хорошо перемешивают, прибавляют 10 %-ный раствор хлористоводородной кислоты до кислой реакции (по лакмусу). Возникновение помутнение или образование осадка указывает на возможное присутствие кумаринов в сырье. Реакция основана на способности кумаринов при нагревании в щелочной среде образовывать соли желтого цвета, растворимые в воде. При добавлении кислоты к раствору образуется кислота кумариновая, которая, замыкаясь, переходит в исходные кумарины, не растворимые в воде 2. Реакция с диазореактивом в щелочной среде. К 2 мл спиртового извлечения прибавляют 5 капель 10 %-ного спиртового раствора калия гидроксида и нагревают на водяной бане в течение 3—5 мин. Затем прибавляют 5 капель свежеприготовленной диазотированной сульфаниловой кислоты. При наличии кумаринов раствор приобретает коричнево-красную или вишнево-красную окраску. Реакция основана на способности кумаринов образовывать окрашенные продукты с ароматическими аминопроизводными. При взаимодействии солей диазония с кумаринами в слабощелочной среде диазо-радикал вступает в 6-положение кумариновой системы, т.е. в пара-положение к фенольному гидроксилу. В результате раствор окрашивается в красный цвет. Однако эта реакция характерна только для чистых кумаринов. Для извлечений, полученных из сырья, эта реакция не характерна, потому что наряду с кумаринами эту реакцию дают другие фенольные соединения. Количественное определение кумаринов проводят титриметрическим, полярографическим, спектрофотометрическим, флуориметрическим и др. методом, учитывая их химическую структуру. Идентификация кумаринов методом ТСХ. Для выделения кумаринов из растительного сырья используют следующие растворители: этиловый спирт, хлороформ, метиленхлорид, диэтиловый эфир, этиловый эфир уксусной кислоты. В некоторых случаях из упаренных растворов кумарины выделяют кристаллизацией и затем очищают многократной перекристаллизацией. Спиртовый раствор (задание 1) и растворы стандартных образцов кумаринов наносят капилляром на линию старта пластинки, покрытой слоем силикагеля. Пластинку сушат на воздухе в течение 5 мин, затем помещают в камеру со смесью растворителей гексан-ацетон (8:2) или бензол-этилацетат (2:1) и хроматографируют восходящим методом. Кумарины в зависимости от структуры имеют в УФ-свете зеленую, ярко-голу- бую, зеленовато-голубую или фиолетовую флуоресценцию, которая усиливается под действием щелочи (обычно хроматограмму выдерживают в парах аммиака). Отмечают пятна кумаринов и цвет их флуоресценции на пластинке карандашом. Хроматограмму опрыскивают 10 %-ным спиртовым раствором калия (или натрия гидроксида) гидроксида, подсушивают в сушильном шкафу при температуре 110—120 °С в течение 2—3 мин. Затем опрыскивают свежеприготовленным раствором диазотированной сульфаниловой кислоты. При наличии кумаринов в извелечении сырья на хроматограмме появляются яркие пятна от красного до фиолетового цвета. Для разделения смеси кумаринов на индивидуальные вещества используют колоночню хроматографию . Медико-биологическое значение кумаринов Для кумаринов характерна фотосенсибилизирующая (плоды псоралеи, амми большой, листья смоковницы), спазмолитическая (плоды пастернака, корни вздутоплодника сибирского и горичника горного), Р-витаминная (семена каштана) активность. В чистом виде они проявляют антикоагулирующее (дикумарол), антимикробное (умбеллиферон), эстрогенное (куместролы клевера), противоопухолевое (остол) действие. Некоторые кумарины обладают инсектицидными свойствами. Кумарины с аминоалкильными заместителями стимулируют ЦНС. Ряд кумаринов и фурокумаринов оказывает бактериостатическое и антигрибковое действие. Кумарины и фурокумарины токсичны для моллюсков и рыб. Кумарины в чистом виде оказывают наркотическое действие на кроликов, гипотензивное и седативное действие на мышей. Является ядом для овец, собак и лошадей. Основные три стороны фармакологического действия кумаринов 1. Фотосенсибилизирующее действие. Фотосенсибилизирующее действие более характерно для фурокумаринов (псорален, ангелицин, императорин и др.). Это действие связано с повышением чувствительности кожи к УФ-лучам, к усиленной выработке меланинов –темных пигментов в базальном слое эпидермиса (в меланобластах). Меланин образуется при окислении аминокислоты тирозина с последующей полимеризацией. Фурокумарины оказывают непосредственное влияние на синтез меланина, очень вероятно, что это происходит на стадии самоокислении тирозина, и усиливает ход реакции в достаточной степени. Не существует связи между фурокумаринами и канцерогенного действия УФ-лучей на кожу. Наиболее высокое фотосенсибилизирующее действие наблюдается у фурокумаринов псоралеи, амми большой и борщевика, из них изготавливают экстракты для перорального и местного применения (“Псорален”, “Бероксан”, “Пастинацин” и др.). Фурокумарины местно используют для облучения ультрафиолетовыми лучами (пероральное применение дает недостоверный результат) депигментированных частях кожи (при болезни витилиго). Ультрафиолетовые лучи усиливают синтез меланина. Вторая область их применения – гнездное облысение. Здесь можно только надеяться на пигментацию волос. 2. Антикоагулянтное действие. Антикоагулянтное действие оптимально только для оксикумаринов, особенно для представителей, в пирановом кольце которых гидроксильные группы располодены в 4 положении. Поэтому присутствие кумаринов в лекарственном растительном сырье не предполагает, что они обладают антикоагулянтным действием. Именно это открытие послужило причиной возникновению антикоагулянтов прямого и непрямого действия. Лекарственные растения содержат дикумарины в малых количествах, и достаточное большое количество кумаринов и при длительном хранении путем медленного окисления получают антикоагулянтное действие. Очень сложно прогнозировать антикоагулянтную степень. Поэтому рекомендовано назначение синтетических и наиболее точно дозированных лекарственных препаратов. При назначении настоя из лекарственных растений, содержащих кумарины, с точно дозированными лекарственными препаратами дожжен проводиться строгий контроль свертывания крови и протромбинового индекса в лабораторных условиях. Механизм антикооагулянтного действия оксикумаринов связан с конкурентным антагонизмом с витамином К и нарушает синтез VII, X, IX и II факторов свертывания крови в гепатоцитах. Гипокоагуляция начинается с латентного периода с продолжительностью 2-3 или более (в зависимости от дозы). Хотя антикоагулянтное действие травы донника, полыни горькой, полыни обыкновенной, цветки, плоды и ствол конского каштана слабое, но в достаточной степени безопасное. Но прогнозировать анткоагулянтное действие с количественной точки зрения очень сложно. В составе различных растительных сборов они очень значимы при варикозном расширении вен, склонных к тромбофлебиту, атеросклерозе артерий нижних конечностей, а также коронарных и мозговых сосудов. Назначение этих растений больным, предрасположенным к потенциальным кровотечениям с другими лечебными целями, нежелательное. 3. Спазмолитическое действие. Спазмолитическое действие присуще в основном фурокумаринам и пиранокумаринам. В этом качестве они часто превосходят флавоноиды, которым сопутствуют в растении. К наиболее активным фурокумаринам относят келлин, келлол, виснагин, пастинацин; к пиранокумаринам - виснадин, самидин, дигидросамидин и другие. Особенно богаты кумаринами, обладающими спазмолитическим действием пастернак посевной, амми зубная, горичник, воздухоплодник сибирский и др.. Фармацевтическая промышленность выпускает лекарственные препараты, содержащие кумарины и экстракт фурокумаринов: “Келлин”, “Ависан”, Пастинацин“, “Фловерин” и др. Максимальный спазмолитический эффект этих лекарственных препаратов наблюдается в коронарных сосудах, в меньшем количестве – в мозговых артерий и конечностей, в минимальном количестве – в полостных органах (бронхах, жкт, мочевыводящих и желчевыводящих путях). По природе это миотропное действие и механизм действия не изучен. Клинический эффект лекарственных препаратов этой группы небольшой, поэтому при острых патологических состояниях рекомендуют назначать их с наиболее активными фармакологическими средствами. Они эффективны на начальной стадии заболевания, особенно в составе фитосборов. жүктеу/скачать 0,72 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|