Кумарины и хромоны. Дубильные вещества. Особенности химической структуры, классификация, физико-химические свойства, пути использования
Методы обнаружения, выделения и исследовании дубильных веществ, применение их в медицине
жүктеу/скачать 0,72 Mb.
|
Лекция 3
| Методы обнаружения, выделения и исследовании дубильных веществ, применение их в медицине.
В связи с тем что дубильные вещества плохо растворимы в холодной воде, на их выход влияние оказывают температура, время набухания и экстракции. Выход дубильных веществ значительно повышается, если сырьё предварительно обработать ультразвуком. В целях предотвращения быстрого окисления к водным извлечениям, содержащим дубильные вещества, рекомендуют добавлять кислоту аскорбиновую или натрия метабисульфит. Разделение дубильных веществ проводят методом фракционной экстракции, препаративной хроматографией на полиамиде, а десорбцию веществ (очищение от адсорбентов) – этанолом или водным раствором метанола. Для удаления аминокилсот, углеводов и других компонентов, растворимых в воде колонку предварительно промывают водой. Изредка для разделения используют препаративную хроматографию на бумаге. Для обнаружения дубильных веществ растительное сырье экстрагируют горячей водой и проводят соответствующие качественные реакции. При взаимодействии танинов с раствором желатина, приготовленном на 10% растворе натрия хлорида, образуется осадок или возникает помутнение раствора. Эта реакция зависит от рН среды. Другие фенольные соединения создают препятствия для обнаружения танинов этой реакцией. Танины дают осадки с алкалоидами (кофеин, пахикарпин, сферофизин и др.), а также некоторыми азотистыми основаниями (новокаин, дибазол, гексаметилентетрамин и др.), эту реакцию используют для их обнаружения. Дубильные вещества с железоаммониевыми квасцами дают черно-синее (гидролизуемые) или черно-зеленое окрашивание (конденсированные). Гидролизуемые дубильные вещества с 10% раствором ацетата свинца выпадают в хлопьевидный осадок. А при добавлении бромной воды конденсированные дубильные вещества выпадают в осадок. Если в растении одновременно содержатся дубильные вещества и гидролизуемой и конденсированной группы, то вначале гидролизуемые дубильные вещества осаждают 10% раствором ацетата свинца, осадок отфильтровывают, а затем проводят реакцию фильтрата с раствором железоаммонийных квасцов. Появление черно-зеленой окраски свидетельствует о наличии веществ конденсированных дубильных веществ.. На хроматограммах в ультрафиолетовом свете галлокатехины проявляются в виде фиолетовым пятен, которые при обработке парами аммиака дают быстро изменяющуюся серо-голубую флуоресценцию. Хроматограммы также можно обработать раствором железа хлорида, но в этом случае другие фенолы тоже обнаруживаются. Хроматограммы можно обработать ванилиновым реактивом (1% раствором ванилина в концентрированной кислоте хлористоводородной). Строение дубильных веществ устанавливают путём полного и стадийного гидролиза (кислотами, щёлочами, ферментами), выделяя при этом промежуточные продукты. С этой целью применяют методы получения ацетильных и перметильных производных, а также перйодатное окисление. Структуру устанавливают с помощью ИК-, ПМР-спектров, ацетильных и других производных. При анализе гидролизуемых дубильных веществ используют расщепление специфическим ферментом таназой - комплекс эстераз. После расщепления галоидных эфиров танназой полученную галловую кислоту титруют щёлочью. Количественное определение дубильных веществ представляет определенные трудности. Обычно используют титрование перманганатом калия и как индиктор применяют индигосульфоновую кислоту. Применяют также фотометрические методы основанные на окислении дубильных веществ реактивом Фолина-Чокальте. В промышленности часто используют метод количественного определения с кожным порошком. С этой целью одну часть растительного экстракта высушивают до постоянной массы, а другую часть пропускают через колонку, наполненную промытым водой кожным порошком, выделяют дубильные вещества и высушивают до постоянной массы. По разнице в массе этих частей рассчитывают количество дубильных веществ, которые связались с кожным порошком. В последние годы для количественного определения дубильных веществ, особенно для количественного определения индивидуальных веществ широко применяются высокожидкостную хроматографию и комбинированные хроматографические методы жүктеу/скачать 0,72 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|