Мазмұны: Кіріспе Негізгі бөлім а. Интерферон және оның типтері ә. Интерферондардың жіктелуі және рөлі б. Интерферондардың әсер ету механизмі в.
жүктеу/скачать 52,58 Kb.
|
- Бұл бет үшін навигация:
- Рекомбинатты интерферондар өндірісі
- Интерферон препараттары
| Иммуномодуляциялық әсер
IFN вирусқа қарсы ғана емес, сонымен қатар негізгі гистосәйкестік кешенінің (MNS) рецепторларының экспрессиясына әсер ету арқылы иммуномодуляциялық әсерге ие. IFN жасушалардың барлық түрлерінде MNS 1-класс молекулаларының экспрессиясын арттырады, осылайша жұқтырған жасушаларды цитотоксикалық т лимфоциттерімен (CTL) тануды жақсартады. Сонымен қатар, IFN-y антигенді ұсынатын жасушаларда MNS 2-класс молекулаларының экспрессиясын күшейтеді, нәтижесінде CD4+ вирустық антигендерінің лимфоциттерге презентациясы жақсарады және табиғи өлтірушілер (NK жасушалары) белсендіріледі. IFN сонымен қатар фагоцитозды ынталандырады. Иммундық реакцияны цитокиндермен (төмендегі суретті қараңыз), соның ішінде интерферондармен реттеу эстафеталық принцип бойынша жүреді, цитокиннің жасушаға әсері оның басқа цитокиндердің – цитокиндік каскадтың пайда болуына әкеледі. Антипролиферативті және ісікке қарсы әрекет Антипролиферативті және ісікке қарсы IFN әсерлері келесі механизмдермен түсіндіріледі: * цитотоксикалық жасушаларды белсендіру; * ісікпен байланысты антигендердің экспрессиясын күшейту; * антиденелер өндірісін модуляциялау арқылы; * ісік өсу факторларының әсерін тежеу арқылы; * ісік жасушасының РНҚ және ақуыз синтезінің тежелуі; * "тыныштық"фазасына өту арқылы жасуша циклінің баяулауы; * ісік жасушаларының жетілуіне ынталандыру; * пролиферацияны бақылауды қалпына келтіру; * ісікте жаңа тамырлардың пайда болуын тежеу арқылы; * метастаздың тежелуі; * цитостатикалық белсенділіктің биомодуляциясы: метаболизмнің өзгеруі және клиренсінің төмендеуі; * көп дәріге төзімділік гендерін тежеу арқылы дәріге төзімділікті жеңу. Бактерияға қарсы әсері Соңғы жылдары IFN-дің Бактерияға қарсы әсері бар екендігі дәлелденді, ол IFN-дің зардап шеккен жасушадағы кейбір ферменттердің белсенділігін индукциялау қабілетіне негізделген: * Индоламин-2,3-дезоксигеназа индукциясы L-триптофанның жасушаішілік құрамының төмендеуіне әкеледі, бұл өз кезегінде метаболизмнің бұзылуына байланысты бактериялық жасушаның өліміне әкеледі; * No-синтетазаның индукциясы бактерия жасушасының жойылуына ықпал ететін no – күшті бактерицидтік фактордың пайда болуына әкеледі. Сонымен қатар, IFN-y Бактерияға қарсы рөлі қабынуға қарсы цитокиндерді, сондай-ақ оттегі мен азоттың белсенді түрлерін, простагландиндерді шығаратын макрофагтарды белсендіру болып табылады. Бұл факторлар бактериялардың өліміне әкелетін қабыну процесінің дамуына ықпал етеді. Эндогендік интерферон гаммасының иммунобиологиялық рөлі Эндогендік IFN-y (төмендегі сурет, кесте) 1965 жылы ашылған (E. F. Wheelock), молекулалық салмағы бар қышқыл ортаға сезімтал гликопротеин 20 000 - 23 000. IFN-y кодтайтын гендер адам ғасырында 12-ші жұп хромосомада кездеседі. Эндогендік IFN-y негізгі өндірушілері-табиғи өлтіруші (NK) жасушалар және т лимфоциттері. Т-лимфоциттердің ішінде IFN-y өндірушілері цитотоксикалық CD8+ - және көмекші CD4+ Т-лимфоциттер болып табылады,бірақ Th дифференциациясында 1 және Th2 IFN-өндіру қабілеті? тек Tx1 бар. Интерфероногенді заттар, антигендер, Т-митогендер және кейбір цитокиндер IFN-y өндірісін индукциялауға қабілетті. IFN-y өндірісі цитокиндердің бақылауында. IL-12 және IL-18 оның экспрессиясын күшейтеді, ал IL-2 IFN-y өндірісін белсендіру арқылы CD4+ лимфоциттер функциясын жүзеге асыруға ықпал етеді. IFN-y синтезі il-4, IL-10, дексаметазон, циклоспорин А, вирустық супрессор ақуыздары, рак клеткалары арқылы басылады. IFN-y фондық мөлшері ағзада әрдайым болады, тіпті егер нәжіс болмаса да, мысалы, интерферон күйін талдау сау адамдар мен жануарларда қандағы IFN-нің әрдайым анықталатын мөлшерін көрсетеді, ол ынталандырылған немесе инфекциямен бірнеше есе артады. Алайда, герпес-вирус инфекциясы кезінде және ісік процесінің соңғы кезеңдерінде IFN-y мөлшері нөлге ұмтылады, өйткені герпес вирусы мен рак клеткалары IFN-y синтезін блоктайтын ақуыздар шығарады. IFN-y басқа IFN-ге ұқсас биологиялық әсерге ие (вирустардың репликациясын тежеу, антипролиферативті әсер, иммуномодуляциялық әсер), бірақ IFN-y цитокин жүйесімен тығыз байланысты және иммунорегуляцияға айтарлықтай үлес қосады. IFN-y биологиялық белсенділігі тиісті транскрипциялық факторлардың белсендірілуіне және инфекциялық агенттерге төзімділік факторлары мен комплементарлы цитокиндерді кодтайтын гендердің бүкіл тобының транскрипциясына әкелетін арнайы жасушалық рецепторлар мен жасушаішілік сигналдық протеинкиназа каскады арқылы жүзеге асырылады. IFN-y әрекетінің мақсатты жасушалары макрофагтар, нейтрофилдер, табиғи өлтіруші жасушалар, бетінде IFN-y рецепторлары бар цитотоксикалық Т-лимфоциттер болып табылады Т-лимфоциттер және макрофагтар. IFN-y-дің маңызды қызметі-оның лимфоциттер мен макрофагтар арасындағы байланыстарды делдалдауға және адаптивті иммундық жауаптың жасушалық және гуморальды компоненттерінің арақатынасын реттеуге қатысуы (сурет. 1). IFN-y макрофагтардың стимуляторы ретінде қызмет етеді, бұл жасушалардың әртүрлі функцияларын, соның ішінде антигендерді өңдеу мен таныстыруды, цитокиндерді өндіруді, оттегі мен азоттың белсенді түрлерін өндіруді жеңілдетеді. IFN-y әсерінен өнімі күшейетін цитокиндерге IL-1 және il-12 жатады (бұл цитокин IFN-y синтезін және т-көмекші дифференциациясын Күшейтеді1). IFN-y бөгде жасушаларды (вирус жұқтырған, ісік) CD8+ цитотоксикалық т-лимфоциттермен тануда маңызды рөл атқаратын I класты MNS антигендерінің экспрессиясын арттырады және антигенді ұсынатын жасушаларда II класты MNS антигендерінің экспрессиясын арттырады. IFN-y ige, IgG(2,4) және IgA синтезін тежеу арқылы Th2 секреторлық белсенділігін төмендетеді. Сонымен қатар, IFN-y Th1-тәуелді адаптивті иммундық жауаптың дамуын күшейтеді. IFN-y өзінің il-4 антагонистімен бірге Th1/Th2 тепе-теңдігін сақтайды. IFN-y көмегімен цитотоксикалық Т-лимфоциттер мен NK-жасушалар цитотоксикалық әсерді (ісікке қарсы және вирусқа қарсы белсенділік) жүзеге асыруға қатысады. Денеге IFN-y енгізген кезде NK жасушаларының белсенділігі бірнеше сағаттан кейін артады. Моноциттер. IFN-y моноциттер мембранасында жоғары аффинді IL-2 рецепторының (IL-2R) экспрессиясын ынталандырады, олардың IL-2-ге сезімталдығын арттырады. Өз кезегінде, IL-2 моноциттерге әсер еткенде олардың ісік жасушалары мен бактерияларды жою қабілетін ынталандырады. IFN-Y және IL-2 стимуляциясы нәтижесінде моноциттер биологиялық белсенді заттар мен қабыну медиаторларының көп мөлшерін шығарады: оттегінің бос түрлері, H2O2, простагландин Е2, тромбоксан В2, TNF-a (ісік некрозының факторы а). Нейтрофилдер. IFN - y нейтрофилдердегі b558 цитохромының белсенділігін арттырады (мысалы, фагоциттер жеткіліксіздігінде-созылмалы гранулематозды ауруда), бұл бактериялардың жасушаішілік жойылуының белсендірілуімен бірге жүреді және инфекция қаупін азайтады. IFN-y қабынудың жедел фазасы ақуыздарының өндірісін белсендіреді, комплемент жүйесінің құрамдас бөліктерінің С2 және С4 гендерінің экспрессиясын күшейтеді. В-лимфоциттер. IFN-y il-4-ке В-жасушалық реакцияны тежейді, IgE өндірісін және cd23-антиген экспрессиясын тежейді. Сонымен, ige гиперөндіріс синдромы және диффузды нейродермит кезінде адамда IFN-y қолданылады, ол IL-4 және il-5 t-көмекші синтезін тежейді. IFN-y-автореактивті клондарды тудыратын дифференциалданған В жасушаларының апоптозының индукторы. Il-4-тің IL-2-тәуелді пролиферациясына және лимфокинмен белсендірілген өлтірушілердің генерациясына супрессиялық әсерін жояды. Осылайша, иммунорегуляцияда маңызды рөл атқара отырып, IFN-y жасушаның негізгі цитокині және гуморальды адаптивті иммундық жауаптың ингибиторы болып табылады. IFN-y вирустық, бактериялық және кейбір протозойлық инфекцияларға қарсы туа біткен және адаптивті иммунитет үшін өте маңызды. IFN-y вирусқа қарсы әсері-бұл вирустық ДНҚ мен РНҚ репликациясын, вирустық ақуыздардың синтезін және жетілген вирустық бөлшектердің жиналуын блоктайды . IFN-y Th1 жасушаларын, NK жасушаларын, макрофагтарды, цитотоксикалық т лимфоциттерін белсендіру арқылы жасушалық иммундық жауапқа әсер етеді. Ол спецификалық емес қарсылықты да, антигенге тән иммундық жауапты да арттырады. Бұл жағдайда IFN-y вирус жұқтырған жасушаларға цитотоксикалық әсер етеді. IFN-y Бактерияға қарсы әсері оның зақымдалған жасушадағы кейбір ферменттердің белсенділігін индукциялау қабілетінде жатыр, бұл метаболизмнің бұзылуына және бактерия жасушасының бұзылуына әкеледі. Сонымен қатар, белсендірілген IFN-y цитотоксикалық т лимфоциттері мен NK жасушалары цитотоксикалық әсерді жүзеге асырады, ал белсендірілген макрофагтар қабынуға қарсы цитокиндер, оттегі мен азоттың белсенді түрлері, простагландиндер шығарады. Бұл факторлар бактериялардың өліміне әкелетін қабыну процесінің дамуына ықпал етеді. IFN-y антипролиферативті әсері РНҚ мен ақуыз синтезін тежеу арқылы ісік жасушаларының өсуін тежеу, жасуша пролиферациясын ынталандыратын ісік өсу факторларын тежеу, "тыныштық" фазасына өту арқылы жасуша циклін баяулату, пролиферацияны тежейтін бақылауды қалпына келтіру, сондай-ақ РНҚ синтезін тежейтін цитотоксикалық т лимфоциттері мен NK жасушаларын белсендіру арқылы цитотоксикалық әсерді жүзеге асыруға қатысады. Осылайша, барлық интерферондар әртүрлі дәрежедегі айқын вирусқа қарсы және ісікке қарсы әсері бар полифункционалды ақуыз факторларының тобы болып табылады. IFN-A барлық интерферондар арасында ең күшті вирусқа қарсы белсенділікке ие, ал IFN-y анағұрлым айқын антипролиферативті белсенділікке ие. Барлық интерферондар әртүрлі ауырлық дәрежесіндегі иммунорегуляторлық әсерге ие (IFN-y макс – симальды)-макрофагтардың, Т-лимфоциттердің және NK жасушаларының белсенділігін арттырады. Рекомбинатты интерферондар өндірісі Интерферондар екі жолмен алынады: лейкоциттер-вирустар әсер еткеннен кейін адам мен жануарлардың донорлық қанынан алынады; рекомбинанттар – генетикалық рекомбинация әдісімен-молекулалық биотехнология арқылы алынады. Лейкоциттер интерферон оларды қолдану кезінде ықтимал инфекцияны болдырмау үшін міндетті түрде вирустарға антиденелердің бар-жоғын тексереді. Рекомбинантты интерферондар мүлдем қауіпсіз, оларды қолданған кезде пациенттің жұқтыру ықтималдығы толығымен жойылады. Генетикалық инженерия биотехнологияның өзегі болып табылады. Ол негізінен генетикалық рекомбинацияға, яғни екі хромосома арасындағы гендердің алмасуына дейін азаяды. In vitro рекомбинация немесе генетикалық инженерия әдісі бір-бірінен ерекшеленетін организмдерден немесе жасушалардан ДНҚ оқшаулау немесе синтездеу, гибридті ДНҚ молекулаларын алу, тірі жасушаларға рекомбинантты (гибридті) молекулаларды енгізу, гендермен кодталған өнімдердің экспрессиясы мен секрециясына жағдай жасау болып табылады. Белгілі бір құрылымдарды кодтайтын гендер немесе оқшауланған (клондалған) (хромосомалар, плазмидалар) немесе шектеу ферменттерінің көмегімен осы генетикалық түзілімдерден мақсатты түрде шығарылады. Бұл ферменттер және олардың мыңнан астамы белгілі, гендік инженерияның маңызды құралы болып табылатын көптеген нақты байланыстар арқылы ДНҚ-ны кесуге қабілетті. Жақында ДНҚ рестриктазасы сияқты белгілі бір РНҚ байланыстары арқылы ыдырайтын ферменттер табылды. Бұл ферменттер рибозимдер деп аталады. Салыстырмалы түрде кішкентай гендерді химиялық синтез арқылы алуға болады. Ол үшін алдымен заттың ақуыз молекуласындағы аминқышқылдарының саны мен тізбегі декодталады, содан кейін осы мәліметтер бойынша гендегі нуклеотидтердің реттілігі анықталады, өйткені әрбір амин қышқылы үш нуклеотидке (кодонға) сәйкес келеді. Синтезатордың көмегімен табиғи генге ұқсас ген химиялық жолмен жасалады. Әдістердің бірі арқылы алынған мақсатты ген лигаза ферменттерінің көмегімен гибридті генді жасушаға енгізу үшін вектор ретінде пайдаланылатын басқа генмен байланысады. Вектор плазмидалар, бактериофагтар, адам, жануарлар мен өсімдіктер вирустары болуы мүмкін. Рекомбинатты ДНҚ түріндегі экспрессияланған ген (мысалы, IFN-y гені) E. coli бактериялық жасушасына енеді, ол экспрессияланған генмен кодталған осы жасушаға тән емес затты (IFN — y) өндіру үшін жаңа қасиетке ие болады. Экспрессияланған геннің реципиенттері ретінде E. coli, V. subtilis, псевдомонас, сальмонеллалардың нетифоидты сероварлары, ашытқылар, вирустар жиі қолданылады. Гендік инженерия әдісімен жүздеген Медициналық және ветеринарлық препараттар жасалды, рекомбинантты суперфродукция штамдары алынды, олардың көпшілігі практикалық қолдануды тапты. Медицинада В гепатитіне қарсы гендік инженерия әдісімен алынған вакциналар, интерлейкиндер-1, 2, 3, 6, инсулин, өсу гормондары, интерферондар a, b, U, ісік некрозының факторы, тимус пептидтері, миелолептидтер, плазминогеннің тіндік активаторы, эритропоэтин, АИТВ антигендері, қан ұю факторы, моноклоналды антиденелер және диагностикалық мақсаттарға арналған көптеген антигендер. Иммундық жауаптың негізгі компоненттерінің бірі-Интерлейкин-2 (IL-2), интерферон гаммасы (IFN-y) және интерферон альфа (IFN-a). Олардың негізінде гуманитарлық және ветеринарлық медицинада кеңінен қолданылатын әртүрлі цитокиндік рекомбинантты препараттар жасалды, соның ішінде: * РЕКОФЕРОН ® ГАММА - IFN-y ("Фарма Ген" ЖШҚ, Санкт-Петербург), * РЕКОФЕРОН ® АЛЬФА-IFN-a ("Фарма Ген" ЖШҚ, Санкт-Петербург). Интерферон препараттары Интерферон препараттары вирусқа қарсы агенттердің жеке тобын құрайды. Олар көптеген қан жасушалары шығаратын табиғи IFN биохимиялық құрылымын декодтау негізінде құрылды. IFN-вирусқа қарсы, иммуномодуляциялық және пролиферацияға қарсы белсенділігі бар шағын молекулалы пептидтер тобы. Рекомбинантты интерферондар негізінде "Фарма Ген" ЖШҚ (Санкт-Петербург) компаниясы ветеринариялық қолдануға арналған РЕКОФЕРОН ® гамма және РЕКОФЕРОН ® АЛЬФА дәрілік препараттарын әзірледі. Рекоферондар ® - рекомбинантты интерферондар. Қазіргі уақытта РЕКОФЕРОН ® ГАММА препараты клиникаға дейінгі және клиникалық сынақтардан, сондай-ақ мемлекеттік тіркеу кезінде "ВГНКИ" ФМБУ-да сынақтардан сәтті өтті, Россельхознадзорда мемлекеттік тіркеу рәсімінен өтті. Тіркеу куәлігінің нөмірі: 78-3-6. 15-2710№ПВР-3-6.15/03158. РЕКОФЕРОН ® гамма-рекомбинантты интерферон гамма (IFN-y), айқын вирусқа қарсы тиімділігі бар, иммуномодуляторларға жатады. IFN-y-табиғи өлтіруші жасушалар, CD4, Th1 жасушалар және CD8 цитотоксикалық супрессорлық жасушалар өндіретін реттеуші цитокин. Интерферон гамма рецепторларында макрофагтар, нейтрофилдер, табиғи өлтіруші жасушалар, цитотоксикалық Т-лимфоциттер бар. IFN-y осы жасушалардың эффекторлық функцияларын, атап айтқанда олардың микробицидтілігін, цитоуыттылығын, цитокиндерді, супероксидті және нитрооксидті радикалдарды өндіруді белсендіреді. IFN-y вирустық ДНҚ мен РНҚ репликациясын, вирустық ақуыздардың синтезін және жетілген вирустық бөлшектердің жиналуын блоктайды. Бұл вирус жұқтырған жасушаларға цитотоксикалық әсер етеді. Интерлейкин-4-ке В-жасушалық реакцияны тежейді, IgE өндірісін және cd23-антиген экспрессиясын тежейді. Бұл автореактивті клондарды тудыратын дифференциалданған В жасушаларының апоптозының индукторы. Интерлейкин-4-тің интерлейкинге-2-тәуелді пролиферацияға және лимфокинді белсендірілген өлтірушілердің генерациясына супрессиялық әсерін жояды. Қабынудың жедел фазасы ақуыздарының өндірісін белсендіреді, комплемент жүйесінің құрамдас бөліктерінің С2 және С4 гендерінің экспрессиясын күшейтеді.IFN-y антипролиферативті әсері РНҚ мен ақуыз синтезін тежеу арқылы жасушалардың өсуін тежеу, сондай-ақ жасушалардың көбеюін ынталандыратын өсу факторларын тежеу болып табылады. жүктеу/скачать 52,58 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|