9
Окончание табл. 2
Стерилизуемый
материал
Метод стерилизации
Режим
стерилизации
Примечание
Жидкие и агаризован-
ные среды, не содер-
жащие сахаров и дру-
гих веществ, разлага-
ющих при 120 °С
То же 1,0
ати; 20 мин
То же
Жидкие и агаризован-
ные среды с сахарами
и другими соединени-
ями, не выдерживаю-
щими нагревания при
120 °С
То же
0,5 ати; 15–30
мин
То же
Среды или компонен-
ты сред , не выдержи-
вающие нагревание
(белки, некоторые
витамины и амино-
кислоты)
Фильтрование через
бактериальные
фильтры
– –
Чашки Петри,
пипетки, шпатели
То же 160–170
°С; 2 ч
Завернуты в
бумагу (отвер-
стия пипеток
закрыты ватны-
ми пробками)
Колбы, пробирки,
химические стаканы,
флаконы, стеклянные
центрифужные про-
бирки
То же 160–170
°С; 2 ч
Закрыты
ватными проб-
ками
Шприцы
Горячий воздух 160
°С; 1 ч
Разобраны и
завернуты в бу-
магу
Автоклавирование
1,0 ати;
15–20 мин
Разобраны и
завернуты в бу-
магу
*ати – атмосферное давление избыточное
Существует термическая и холодная стерилизация.
Термическая стерилизация осуществляется прокаливанием в
пламене и обжигание, горячим воздухом (сухожаровая стерилизация),
насыщенным под давлением паром (автоклавирование), дробная стери-
лизация (тиндализация), кипячением и др.
10
1. Прокаливание на огне: в пламени горелки или спиртовки
обычно стерилизуют петли и иглы для посева, предметные стекла, ин-
струмент.
2. Кипячение – в течение 30 мин: обычно кипятят шприцы, иглы,
пищевые продукты и др. При этом могут сохраняться споры бактерий.
3. Стерилизация сухим жаром (сухожаровая) – в специальном
сушильном шкафу, как правило, стерилизуют хорошо вымытую посуду:
колбы, пробирки и др.; обычно каждый предмет завертывают в перга-
ментную бумагу. При температуре 160–170 °С погибают не только все
микроорганизмы, но и их споры.
4. Стерилизация паром проводится при температуре 100–120 °С,
так как во влажной атмосфере микроорганизмы погибают быстрее при
более низкой температуре.
Существует два способа стерилизации паром:
а) стерилизация насыщенным паром под давлением
Данный способ стерилизации питательных сред является наиболее
надежным и чаще всего приемлемым. Он основан на нагревании мате-
риала насыщенным водяным паром при давлении выше атмосферного.
Совместное действие высокой температуры и пара обеспечивает особую
эффективность этого процесса (табл. 2).
Таблица 3
Температура насыщенного пара при разных давлениях
Давление
Температура, °С
100 111 121 128 134
ати
0,0 0,5 1,0 1,5 2,0
атм
1,0 1,5 2,0 2,5 3,0
Обычно автоклавирование осуществляется при температуре 121 °С
(1 атм) в течении 15–30 мин, при этом погибают и вегетативные клетки
споры микроорганизмов). Этот способ не приемлем для тех сред, кото-
рые содержат в своем составе белки или другие вещества, разрушающи-
еся при высокой температуре;
б) стерилизация текучим паром (тиндализация)
Тиндализация, стерилизация текучим паром применяется для сред,
портящихся при действии температур выше 100 °С. Тиндализацию
осуществляют текучим паром в автоклаве с завинченной крышкой или в
кипятильнике Коха. Среды нагревают несколько раз по 10–15 мин.
Между прогреванием среды ставят в термостат при температуре 30 °С
на 8–12 ч для прорастания жизнеспособных спор. Среды, не выдержи-
вающие нагревание при 100 °С, прогревают более осторожно: при 60–80
°С через каждые 8–12 ч 4–5 суток подряд.
11
5) Пастеризация – метод, применяемый для уничтожения неспо-
роносных бактерий в питательных средах (вине, молоке, соке, пиве и
др.), теряющих свои качества при кипячении. Пастеризуют среды в те-
чение 15–30 мин. при температуре 50–60 °С или в течение 5–10 мин.
при температуре 70–80 °С в водяной бане или термостатах.
Достарыңызбен бөлісу: