Molecular Biology of the cell клетканың молекулалық биологиясы Алтыншы басылым, І том



Pdf көрінісі
бет325/330
Дата27.09.2022
өлшемі52,26 Mb.
#40449
1   ...   322   323   324   325   326   327   328   329   330
М5.1-суретте
көрсетілген (электрондық ми-
кроскоп көмегімен бір ДНҚ молекуласының бағытын басқа молекуламен салыстыру 
негізінде анықтау мүмкін еместігін ескеріңіз).
Сіз өз тұжырымыңызды зертхана мүшелеріне ертең баяндауыңыз қажет. Сіздің же-
текшіңіз қоятын екі сұраққа қалай жауап бересіз? Репликацияның басталу нүктелері 
қанша? Репликация бір немесе екібағытты ма?
5.11
Сіз клеткалар культурасында ДНҚ синтезін, 
3
Н-тимидин көмегімен, репли-
кативтік айырды таңбалау арқылы зерттеудесіз. Сіз клеткаларды, ДНҚ-ның ұзын тіз-
бектерін созып, кейін бөліп алуға мүмкіншілік беретін әдіспен бұзасыз. Сонан кейін 
ДНҚ-ны фотографиялық эмульсиямен жабасыз және 3-6 ай бойы инкубациялайсыз. 


362 5-тарау. ДНҚ репликациясы, репарациясы және рекомбинациясы
Эмульсия радиоактивті сәулелерге сезімтал болғандықтан 
3
Н-тимидин күміс түйіршік-
тер түріндегі іздер қалдырады. Созылу нәтижесінде репликативтік көпіршік бұзылады 
да, еншілес дуплекстер қатар орналасады және оларды ажырату мүмкін емес болады.
М5.1-сурет. 
Жануар вирусының ата-аналық және репликацияла-
натын түрлері (5.10-мәселе).
Сіз оларды S фазаның басында синхронизациялау мақ-
сатында клеткаларды қыздырасыз. Бірінші тәжірибеде
сіз синхронизацияланған блок пен 
3
Н-тимидинді лезде 
босатасыз. 30 минуттан кейін клеткаларды шаясыз және 
қоректік ортаны, тимидиннің бастапқы концентрациясын 
өзгертпей, алмастырасыз. Осыдан 15 минуттан кейін сіз 
ДНҚ-ны авторадиографияға дайындайсыз. Тәжірибе нәти-
желері 
М5.2А-суретте
көрсетілген. Екінші тәжірибеде 
сіз синхронизацияланған блокты жылдам босатасыз да,
3
30 минуттан кейін оған Н-тимидинді қосасыз. 
3
Н-тими-
динмен 30 минут инкубациялағаннан кейін клеткаларды 
шаясыз және қоректік ортаны, тимидиннің бастапқы концентрациясын өзгерте отырып, 
ауыстырасыз және тағы да 15 минут инкубациялайсыз. Екінші тәжірибенің нәтижелері 


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   322   323   324   325   326   327   328   329   330




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет