Учебное пособие Персиановский 2019 ббк 28. 57 Ф 50



бет21/80
Дата10.03.2023
өлшемі1,45 Mb.
#73169
түріУчебное пособие
1   ...   17   18   19   20   21   22   23   24   ...   80
Байланысты:
Физиология и биохимия Гужвин СА 2019 172с.

РАБОТА 10


Цветные реакции на белки

Наличие специфических связей и химических группировок, со- держащихся в аминокислотных радикалах полипептидной цепи бел- ка, определяют характерные цветные реакции. Реакционная способ- ность и интенсивность окраски образующихся продуктов указывает на особенности химической структуры веществ и их качественное содержание. На основе цветных реакций разработаны и широко при- меняются методы количественного и качественного анализа белко- вых веществ.


Цель работы: изучить особенности белков и их физико- химических свойств.
Объект исследования: гороховая мука.
Ход работы. Приготовить вытяжку глобулина (см. работу № 9).

  1. Биуретовая реакция. Реакция обусловлена наличием в моле- куле белка пептидных связей (-СО-NН-).

Налить в пробирку 1 мл вытяжки белка, добавить 2 мл 20%-го раствора NaOH и взболтать. Затем прибавить 4-5 капель слабого рас- твора CuSO4. Образующийся осадок гидрата окиси меди в присут- ствии белка окрасит раствор в сиренево-фиолетовый цвет.

  1. Ксантопротеиновая реакция. Она обусловлена образованием нитросоединений ароматическими и некоторыми гетероциклически- ми группами белка, указывает на присутствие в молекуле полипепти- да ароматических аминокислот – фенилаланина, тирозина, триптофа- на.

В чистую пробирку налить 2 мл вытяжки белка и 0,5 мл крепкой азотной кислоты, и нагреть до кипения. При этом белок свернется и окрасится в желтый цвет. Раствор остудить и добавить около 1 мл аммиака. В результате желтый цвет перейдет в оранжевый.

  1. Миллонова реакция. Она является качественной реакцией на белки, содержащие фенольный радикал, протекает в присутствии ре- актива Милона.

В чистую пробирку налить 2 мл раствора белка и добавить 1 мл азотнортутного реактива Милона. При этом происходит денатурация белка и выпадение его в осадок. Затем нагреть пробирку на водяной бане до 500С. В результате осадок окрасится в мясо-красный цвет.

  1. Реакция с уксусно-кислым свинцом. Она указывает на наличие в белковой молекуле цистеина и цистина, содержащих атомы серы.

В чистую пробирку налить 1 мл раствора белка и добавить двойной объем гидроксида натрия, перемешать и прокипятить 2-3 минуты. Затем налить 0,1-0,2 мл раствора уксусно-кислого свинца и продолжить нагревание до появления черного осадка.
Оформление работы. Результаты опыта зарисовать и сделать соответствующие выводы.
Материалы и оборудование: гороховая мука, 10%-ный раствор сульфата аммония, 20%-ный раствор NaOH, CuSO4, крепкая азотная кислота, аммиак, ре- актив Милона, уксусно-кислый свинец, колба, воронки, пробирки, фильтро- вальная бумага, водяная баня.




Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   17   18   19   20   21   22   23   24   ...   80




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет