Учебное пособие Персиановский 2019 ббк 28. 57 Ф 50
жүктеу/скачать 1,45 Mb.
|
Физиология и биохимия Гужвин СА 2019 172с.
- Бұл бет үшін навигация:
- Цель работы
Рисунок 10. Уста- новка для рассмат- ривания концентри- рованной спиртовой вытяжки хлоро- филла в проходящих лучах
РАБОТА 28Количественное определение пигментов Хлорофилл и каротиноиды являются важнейшими компонента- ми фотосинтетического аппарата растений. Количественное содержа- ние этих пигментов в листьях зависит от генетической природы орга- низма и его жизнедеятельности. Поэтому оно может быть использо- вано как физиологический показатель. Количество пигментов отра- жает реакцию растения на условия произрастания. В связи с этим возникает необходимость проследить динамику содержания пигмен- тов в органах растения. Определение содержания пигментов проводят спектрофото- метрическим методом. Данный метод является наиболее точным при определении содержания пигментов листа. Концентрацию пигментов на спектрофотометре определяют по оптической плотности. При этом возможно определить содержание хлорофиллов и каротиноидов в вы- тяжке без предварительного разделения. Содержание хлорофилла в листьях растений достигает 0,7 % сырой массы, в среднем составляя около 0,3%. При расчете на 1 дм2 листовой поверхности количество хлорофилла варьирует в пределах 0,7-0,8 мг. Каротиноидов в листьях примерно в 3-8 раз меньше, чем хлорофилла. Цель работы: определить количество хлорофилла и каротинои- дов в листьях растений. Объект исследований: листья крапивы (Urtica dioica). Ход работы. Получение вытяжки пигментов. Взять навеску 2-3 г листьев растений. Ножницами или специальными шаблонами наре- зают листья так, чтобы средняя и крупные жилки не попадали в про- бу. Навеску листьев растирают в фарфоровой ступке, прибавив пред- варительно на кончике скальпеля СаСОз (для нейтрализации кислот клеточного сока) и небольшое количество кварцевого песка (для лучшего размельчения листьев, разрушения клеточных оболочек). Хорошо растѐртую массу заливают в ступке 95 %-ным ацетоном (5- 10 мл.) и растирают снова. После непродолжительного отстаивания жидкость сливают по стеклянной палочке (по возможности без осад- ка) в воронку со стеклянным пористым фильтром, укреплѐнную в колбе Бунзена, и фильтруют с помощью масляного насоса. Эту часть работы выполняет дежурный. К растѐртой массе снова прибавляют 3- 5 мл ацетона, растирают в течение нескольких минут и фильтруют через ту же воронку. Определение концентрации пигментов. Определение содержа- ния пигментов проводят на спектрофотометре. Плотность экстракта на приборе измеряют при длинах волн, соответствующих максиму- мам поглощения хлорофиллов а и b в красной области спектра и при длине волны абсорбированного максимума каротиоидов. Концентра- цию пигментов рассчитывают по следующим уравнениям. Для 100%-го ацетона (по Хольму-Веттштейну): жүктеу/скачать 1,45 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|