Таблица 27 – Окраска раствора в пробирках
Вариант
|
Состав смеси в пробирке
|
Окраска раствора в пробирках
|
картофельный
сок (носитель пероксидазы)
|
перекись водорода
|
гидрохинон
|
1
|
+
|
+
|
+
|
|
2
|
-
|
+
|
+
|
3
|
+
|
-
|
+
|
4
|
+
|
+
|
+
|
Материалы и оборудование: клубни картофеля, нож, терка, марля, во- ронка на 50 мл, штатив с пробирками, пипетки, 1%-ный раствор гидрохинона, 3%-ный раствор перекиси водорода.
РАБОТА 38
Обнаружение дегидрогеназ в растениях
Дегидрогеназы – ферменты, катализирующие отщепление водо- рода от окисляемых субстратов. В зависимости от способности окис- лительно-восстановительных ферментов передавать отщепляемый от окисляемого субстрата водород непосредственно на кислород воздуха различают аэробные дегидрогеназы (оксидазы) и анаэробные дегид- рогеназы. Оксидазы – ферменты, способные переносить водород от окисляемого вещества непосредственно на кислород воздуха, а анаэ- робные дегидрогеназы – ферменты, неспособные переносить водород на кислород воздуха. Они передают отщепляемый водород другим акцепторам, ферментам.
Дегидрогеназную активность можно обнаружить по интенсив- ности восстановления метиленовой сини в анаэробных условиях. При восстановлении метиленовой сини образуется бесцветное лейко- соединение, в результате чего реактивная смесь обесцвечивается.
Восстановление метиленовой сини идет по следующей схеме:
Суб. • Н2 + МС Суб. + МС • Н2.
восстан. окисл. лейкоформа
субстрат субстрат
Цель работы: обнаружение дегидрогеназы.
Объект исследования: семена гороха (Pisum sativa).
Ход работы. Взять 10 семян набухшего и 10 прокипяченных семян гороха, очистить их от семенной оболочки. Затем поместить в две пробирки отдельно проросшие и прокипяченные семена, залить их раствором метиленовой сини и оставить на 20 минут. Через 20 ми- нут слить краску с обеих пробирок, промыть семена водой, а затем для создания анаэробных условий залить дистиллированной водой. Поместить пробирки на два часа на водяную баню при температуре 300С. Через два часа достать пробирки из водяной бани, слить воду и высыпать семена в фарфоровые тигли.
Оформление работы. Отметить окраску семян, зарисовать про- бирки с семенами и сделать вывод об изменении окраски живых и прокипяченных семян.
Материалы и оборудование: набухшие и прокипяченные семена гороха, пробирки, фарфоровые чашки, водяная баня, электроплитка, термометр, рас- твор метиленовой сини 1׃2000, скальпель, пинцет.
Достарыңызбен бөлісу: |
