| 33)Эукариоттардың белоктарының деградациясының убиквитин-протеосомды жолын түсіндіріңіз және 26 протеосома құрылысына сипаттама беріңіз
Белоктардың убиквитинирленуі
ПТМ бұл түрі нысана-белоктарға убиквитинді —76 амин қышқылынан түратын пептидті қосып алуына негізделген. Убиквитинирлену 26S протеасомадағы АТФ-тәуелді белок протеолизінің міндетті шарты болып табылады. Ол эукариотты организмдерде клеткалық цикл регуляциясында, дифференцировкада, сыртқы орта жағдайларына клетканың жауабында маңызды рөл атқарады.
Деградацияның бұл жолының субстраттары циклиндер, протеинкиназа ингибиторлары, транскрипцион-дық факторлар, метаболизмнің кілттік ферменттері, сонымен қатар, зақымдалған және дұрыс емес конформациясы бар белоктар жатады. Соңғы жылдары белок сортингісінде, сигналды трансдукцияда, ДНҚ репарациясында, транскрипцияда да маңызды рөл атқарады.Убиквитиннің белокқа байланысуы реакциялар каскадымен жүзеге асады, онда убиквитин- активтендіруші (Е1) және убиквитин-конъюгирлеуші (Е2) ферменттер, сонымен қатар убиквитин-лигазалар қатысады (Е3). Нәтижесінде с-концевого глицина убиквитин С-соңы глицинінің СООН-тобы белгілі бір белоктың лизинінің ε-амин тобымен изопептидті байланыс түзеді. N-соңы амин тбының және цистеиннің SH-тобының модификациялары белгілі.
Убиквитинирлену/деубиквитинирленудің ферменттер тұқымдасы көп: адамда E1 16 өкілдері, E2 53 өкілдері, E3 527 өкілдері, DUB 184 өкілдері табылған
Убиквитинирленген белоктар құрамы аз болғандықтан масс-спектралды анализ үшін үлгіні аффинді хроматографиямен бағанада модификацияланған белоктарға алдын ала иммобилизденген убиквитин-байланыстырушы белоктармен немесе антиденелермен байыту керек. При работе с дрожжами S. сerevisiae ашытқыларымен жұмыс жасағанда убиквитин синтездейтін штаммадрды қолданады, олар биотинмен немесе гистидиннің 6 қалдық тізбегімен қосылған болады.
Достарыңызбен бөлісу: |
