2015 ж., желтоқсан №4 №4, декабрь 2015 г
жүктеу/скачать 6,12 Mb. Pdf көрінісі
|
- Бұл бет үшін навигация:
- ВЕТЕРИНАРИЯ 98 Conclusion
- Сведения об авторах
- ВЕТЕРИНАРИЯ
- THE RESULTING FUSION OF CULTURED CELLS THAT PRODUCE ICA DRUG CARDIAC TROPONIN T
- ЖҤРЕК Т - ТРОПАНИНІ ПРЕПАРАТЫНАН КУЛЬТИВИРЛЕНГЕН ГИБРИДТОРЛАРЫН АЛУ
ВЕТЕРИНАРИЯ 96 commenced in 1962 with their introduction as new adsorbent materials with improved stability charac- teristics. The applications of clinoptiolite in radio- active waste recovery and in waste water treatment during the same period of the 60's were based not only on superior stability characteristics but also high cation exchange selectivity for cesium, stron- tium, and for ammonium ion. The well known and industrially important zeolites have been discovered in 1950-1970 and may be classified into three groups according to Al/Si ratio in their frameworks [3]. An important group of substances belonging to the indispensable nutritional factors and influences the quality and nutritional value of meat and its products are minerals. Minerals found in different parts of the fish body in unequal amounts. Minerals found in the ash obtained by burning the meat and other parts and organs of the fish. The greatest amount of mineral elements contained in the bones. Total amounts of minerals in the body of the fish are 4%. In fish quantitatively predominant phosphorus, calcium, potassium, sodium, magnesium, sulfur, and chlorine (macronutrients).The rest of the detected elements - iron, copper, manganese, cobalt, zinc, molybdenum, iodine, bromine, fluorine, etc.In very small amounts (micronutrients). The bulk of calcium and phospho- rus in the body of the fish found in the bones, forming their hard skeleton. Sodium, potassium, phosphorus, magnesium, chlorine included in the sarcoplasmic muscle cells, interstitial fluid, blood plasma. Sulfur is included in the composition of proteins. Great physiological importance is the trace elements that are part of a series of important organic compounds. In marine fish meat contains more minerals than meat fresh. An important difference between marine and freshwater fish is the almost complete absence in the meat of freshwater fish of iodine and bromine [4]. Materials and methods The mineral composition of fish meat was assessed as follows: iron was determined by the colorimetric method using GOST26928-86; while for the determination of calcium and magnesium GOST-09-066-02 was used. For determining mineral content the method of dry ashing was used. That istook place in anashing muffle furnace at 400- 600°C. In order to accelerate the process of loosening using NH (CO) a sample was placed in a bomb chamber filled with oxygen and closed. The combustion process took three minutes. The resultant ash containing metal oxides was treated with a solution of HCl (1: 1) to obtain the soluble metal chlorides. Research results Results of the analysis of the mineral composition of valuable species of fish are shown in Tables 1-2. Studies of the mineral composition of meat of rainbow trout and sturgeon have shown that it is rich with essential functionally significant components that make them biologically valuable product. The mineral components as evidenced by the results obtained are not significantly different for the test and control samples of meat, except iron and zinc, which level is somewhat lower in the meat of rainbow trout fed NFA Tseofish. In our opinion, this may be due to high adsorption capacity of the latter. In the study of the meat of rainbow trout and sterlet in the feed, a feed additive which adds Tseofish content of sodium and potassium was in physiological amounts, which allows maintaining the osmotic pressure of body fluids and participating in the formation of a buffer system of tissues and biological fluids. The amount of manganese in the range - 0,11-0,22 g/100 g of meat of rainbow trout in the experimental groups and 0,016-0,027 mg/kg meat sterlets increases glycogen synthesis, and increases the efficiency of absorption of vitamins C and B, which actively influences growth and development of fish. The content of calcium and phosphorus in the experimental groups of valuable fish species also remained normal, significant changes in the direction of decreasing was observed. ВЕТЕРИНАРИЯ 97 Table 1 - Mineral content in the meat of rainbow trout (control and test, mg 100 g) Indicators units of measurement Control group (n=20) Experimental group (n=20) Physiological norm 1% 2% 3% 4% Macronutrients mg/kg К 380 ±0 ,7 411,7 ± 0,3 420±0,21 431,8 ±0 ,15 451,8 ±0 ,23 60-420 Ca 34,5 ±0 ,61 32,5 ±0 ,16 34 ±0 ,17 36,78 ±0 ,13 37,4 5±0 ,13 17-270 Mg 25±0 ,77 24,55 ±0 ,2 25, 9± 0,07 26,43 ± 0,51 27,1 5±1 ,43 10-170 Na 54,9 ±0 ,7 57± 0,19 56±0,19 57,5±0,17 58±0,41 30-130 P 209,9±0,68 208,6±0,24 205,5±0,15 213,01±0,23 215±0,121 110-550 Micronutrients mg/kg Fe 0, 8±0 ,07 0,7 ±0 ,014 0,6±0,017 0,62±0,003 0,7±0,58 0,3-4,6 Zn 2,1 ±0 ,02 1, 79±0 ,002 1,92±0,002 1,81 ±0 ,005 1,90 ±0 ,82 0,05-0,60 Mn 0,14 ±0 ,004 0,14 ±0 ,002 0, 15±0 ,002 0, 21±0 ,003 0, 22±0 ,53 0,016-0,044 Table 2 - Mineral content in the meat of sturgeon (control and test, mg 100 g) Indicators units of measurement Control group (n=20) Experimental group (n=20) Physiological norm 1% 2% 3% 4% Macronutrients mg / kg К 280 ±0 ,032 289 ± 0,043 297±0,069 303 ±0 ,058 308 ±0 ,048 60-420 Ca 44 ±0 ,023 47 ±0 ,056 53 ±0 ,239 58 ±0 ,357 61 ±0 ,357 17-270 Mg 66 ±0 ,035 69 ±0 ,092 72 ±0,245 75,1 ± 0,95 78,9 ± 0,64 10-170 Na 92 ±0 ,02 98 ± 0,002 103±0,42 107±0,0 32 111±0,56 30-130 P 259±0,34 263±0,204 268±0,394 277±0,053 283±0,102 110-550 Micronutrients ug / kg Fe 0,7 ±0 ,03 0,8 ±0 ,06 0,8±0,05 0,9±0,06 0,9±0,05 0,3-4,6 Zn 0,6 ±0 ,35 0,6 ±0 ,56 0,7±0,78 0,7 ±0 ,78 0,7 ±0 ,45 0,05-0,60 Mn 0,0 15±0 ,75 0,016 ±0 ,81 0,020 ±0 ,74 0,023 ±0 ,72 0,027 ±0 ,53 0,016-0,044 ВЕТЕРИНАРИЯ 98 Conclusion After analyzing the obtained parameters of the mineral composition of meat of valuable fish species in the feed, a feed additive which adds Tseofish we came to the conclusion that certain trends in the overall reduction of mineral substances in the meat of rainbow trout and sterlet experimental groups were noted. References: 1. Konakova A. Overenie prıpravku ZeoFeed na parametre uzitkovostivo vykrme brojlerovych kurciat Bratislava:Ustredny kontrolny askusobny u stav polnohospodarsky. – 2003. – protocol 316. 2. Konakova A. Overenie prıpravku ZeoFeed na parametre uzitkovostinosnı´c -biologicka skuska. - Bratislava: Ustredny kontrolny asku sobny u stav polnohospodarsky, 2003. - protokol 317. 3. Cincotti A., Lai N ., Orrù R., Cao G. Sardinian natural clinoptilolites for heavy metals and ammoni- um removal: experimental and modeling // Chemical Engineering Journal. - 2001. - № 84. - P. 275-282. 4.Abusafa A., Yucel H.Removal of 137Cs from aqueous solutions using different cationic forms of a natural zeolite: clinoptilolite // Separation and Purifi- cation Technology. - 2002. - Vol. 28, № 2. -P. 103- 116. Сведения об авторах Паритова Асел Ержанқызы – Казахский Национальный аграрный университет, PhD, ассистент, город Алматы, площадь Абая, 28, тел. 8 707 806 56 17, e-mail:paritova87@mail.ru Алиханов Қуантар Дәуленұлы – Костанайский государственный университет им.А.Байтур - сынова, PhD, город Костанай, ул. Байтұрсынов 47, тел. 8702 671 71 87, e -mail: mr.kuantar_87@ mail.ru Лозовицка Божена – Институт защиты растений, доктор химических наук, профессор, город Белосток, ул. Хельмонскего, 11, e -mail: bozena.lozowicka@mail.ru Джакипов Еркебулан Сейдахметович - PhD докторант Костанайского государственного университета имени А.Байтурсынова, магистр ветеринарных наук, г.Костанай, ул. Пушкина 138, тел. 87016285677, e-mail: yerkazak@mail.ru Паритова Асел Ержанқызы – Қазақ Ұлттық аграрлық университеті, PhD, ассистент, Алматы қаласы, Абай даңғылы, 28, тел. 8 707 806 56 17, e-mail:paritova87@mail.ru Алиханов Қуантар Дәуленұлы - А.Байтұрсынов атындағы Қостанай мемлекеттік универси - теті, PhD, Қостанай қаласы, Байтұрсынов к - сі 47, тел. 8702 -671-71-87, e-mail: mr.kuantar_87@ mail.ru Лозовицка Божена – Ӛсімдік қорғау институты, химия ғылымдарының докторы, профессор , Белосток қаласы, Хельмонскего кӛшесі, 11, e -mail: bozena.lozowicka@mail.ru Джакипов Еркебулан Сейдахметович - А.Байтұрсынов атындағы Қостанай мемлекеттік университетінің PhD докторанты, ветеринария ғылымдарының магистрі, Қостанай қаласы, Байтұрсынов к - сі 47, тел. 87016285677,, e-mail: yerkazak@mail.ru Paritova Assel Yerzhankyzy - Kazakh National Agrarian University, PhD, Assistant, Almaty, Abai square, 28, tel. 8707806 56 17, e-mail: paritova87@mail.ru Alihanov Kuantar Daulenuly - Kostanai State University named after A.Baytursynov, PhD, Kostanai, Baytursynov Street 47, tel. 8702 671 71 87, e-mail: mr.kuantar_87@mail.ru Lozovicka Bozena - Institute of Plant Protection, Doctor of Chemistry, professor, Bialystok, ul. Chelmonskego, 11, e-mail: bozena.lozowicka@mail.ru Dzhakipov Erkebulan Seydahmetovich- PhD doctoral Kostanay state universitet after A.Baitursynov, master of veterinary medicine , Kostanai str. Pushkin 138 , tel. 87016285677, e-mail: yerkazak@mail.ru УДК 619:606:637.07 ПОЛУЧЕНИЕ ГИБРИДНЫХ КУЛЬТИВИРУЕМЫХ КЛЕТОК, ПРОДУЦИРУЮЩИХ МКА К ПРЕПАРАТУ СЕРДЕЧНОГО ТРОПОНИНА Т Дордочкина С.А - магистр технических наук, преподаватель Костанайского государствен - ного университета им.А.Байтурсынова, г.Костанай Картабаева Г.О. - магистр технических наук , Костанайский государственный универси - тет им.А.Байтурсынова, г.Костанай В данной статье освещены вопросы диагностики сердечно - сосудистых заболеваний с по - мощью кадрдиомаркеров. Кардиомаркеры - это белки сердечной мышцы, наиболее крупные из них ВЕТЕРИНАРИЯ 99 тропонины с молекулярной массой 37кДж (тропонин I) и 24 кдж (тропонин Т). Для конструирования ИХА теста при диагностике инфарктного состояния, работали над созданием гибридных клеток, продуцирующих моноклональные антитела к препарату сердечного тропонина Т. Начальным этапом проведения исследования явилось иммунизация лабораторных мышей. Иммунизацию мышей проводили по длительной схеме, включающей в себя четырехкратное парентеральное введение препарата в дозе 50 мкл с адъювантом Фрейнда в течение 8 - ми недель с двухнедель - ными перерывами.сыворотки крови проверяли в непрямом варианте ИФА. В результате титр антител составил 1:6400, 1:12800. Для создания гибридом использовали клетки миеломной линии Х63 – Ад 8.653. По исте - чении 10 дней после гибридизации было обнаружино 68 гибридных клонов, выход гибридом сос - тавил 18%. Культутуральную жидкость тестировали методом непрямого варианта твердофаз - ного иммуноферментного анализа. По результатам было выявлено 9 клонов, активно вырабаты - вающих специфические антитела к препарату сердечного тропонина Т. Ключевые слова: иммунизация, иммунная сыворотка, антиген, антитело, иммуноген, моноклон, гибридома. THE RESULTING FUSION OF CULTURED CELLS THAT PRODUCE ICA DRUG CARDIAC TROPONIN T D ordochkina S.A., Master of Engineering Scieence, teacher of RSE «KSU names of A.Baytursynov» Kartabaeva G.O., Master of Engineering Scieence This article highlights the problems in the diagnosis of cardiovascular disease using kadrdio- markerov. Cardiac markers - are proteins of the heart muscle, the largest of them with a molecular weight of troponins 37kDzh (troponin I) and 24 kJ (troponin T). For the construction of ELISA test in the diagnosis of infarction state, we worked on the creation of hybrid cells producing monoclonal antibodies to the drug cardiac troponin T. Immunization of mice was performed by continuous circuit comprising fourfold parenteral administration of the drug in a dose of 50 .mu.l with Freund's adjuvant for 8 weeks at two-week intervals. The initial stage of the study was the immunization of laboratory mice, the serum was tested in indirect ELISA. As a result, antibody titer was 1: 6400, 1: 12800. To create a hybrid myeloma cell line using X63 - Ад 8.653. By 10 days after hybridization was found 68 hybrid clones, hybridomas yield was 18%. The culture fluid was tested by indirect variant ELISA. As a result it was revealed nine clones actively produced antibodies specific to the drug cardiac troponin T. Keywords: immunization, immune serum, antigen, antibody, an immunogen. ЖҤРЕК Т - ТРОПАНИНІ ПРЕПАРАТЫНАН КУЛЬТИВИРЛЕНГЕН ГИБРИДТОРЛАРЫН АЛУ Дордочкина С.А. - РМК «А.Байтұрсынов атындағы ҚМУ» оқытушы, техника ғылымдарының магистрі, Қостанай қ. Картабаева Г.О - техника ғылымдарының магистрі Бұл мақалада кардиомаркерлердің кӛмегімен жүрекқантамырлары ауруларын болау туралы мәселелер қарастырылған. Қардиомаркерлер - бұл жүрек бұлшық еттерінің ақуызы, булардың ішін - дегі ірілері 37 кДж (тропонин I) және 24 кДж (тропанин Т) молекулалық массасымен тропаниндер болып табылады. ИХА тесті құрастыру үшін жүрек жұмысын болауда, гибридті жасушаларды құрастыруда, жүрек тропанині Т препаратына моноклоналды антидене ӛндіру бойынша жұмыстар жасалынды. Зерттеу жүргізудің алғашқы сатысында зертханалық тышқандарды иммунизациялау, қан сарысуын ИФА теріс нұсқасында тексерді. Нәтижесінде антиденелердің титрі 1:6400, 1:12800 қурады. Гибридомдарды қурастыру үшін Х63 - Ад 8.653 миеломды торша сызықтары қолданылды. Гибридизациядан соң 10 күннің ішінде 68 гибридті клен, гибридомалардың мӛлшері 18% құрады. Иммуноферментті сараптама арқылы культуральды суйықтықты қатты фазалы теріс әдіспен тексерді. Нәтижесінде 9 клон анықталып, оның жүрек Т тропонині препаратына арнайы анти - денелер табылды. Негізгі сӛздер: иммунизация, иммунды қан сарысуы, антиген, антидене, иммуноген. В настоящее время сердечно - сосудитые заболевания являются наиболее частой при - чиной смерти, поэтому социальную и медицин - скую значимость данной патологии сложно пере - оценить. Для своевременного ее выявления и прогнозирования течения используются много - ВЕТЕРИНАРИЯ 100 численные методы диагностики. В частности, это группа лабораторных тестов, направленных на определение состояния миокарда и оценку фак - торов риска развития сердечно - сосудистой пато - логии. Данные исследования достаточно разно - родны по своему содержанию, однако общность назначения позволяет объединить их под общим условным названием – кардиомаркеры. Кардиомаркеры – это белки сердечной мышцы, являющийся одним из компонентов со - кратительного аппарата поперечно - полосатых мышц, позволяющий мышечным волокнам, акти - на и миозина скользить относительно друг друга. Они подразделяются на несколько видов: миог - лобин, гомоцистеин, с - реактивный белок (СРБ), креатинкиназа -MB (CK- MB),тропонин Т (cTnT) и тропонин I (cTnI). Они играют очень важную роль в диагностике острого инфаркта миокарда. На первом месте по популярности находятся тропо - нины (I и Т), кардиомаркеры которые в настоя - щее время играют ключевую роль в диагностике ОИМ и входят в список критериев универсаль - ного определения инфаркта миокарда в США и странах Западной Европы [6]. Тропонины – это довольно крупные бел - ки, с молекулярной массой 37 кДа (тропонин I) и 24 кДа (тропонин Т). Содержание этих двух бел - ков в миокарде достаточно высокое и составляет для тропонина Т около 5 мг/г, а для тропонина I приблизительно 10 мг/г. Так называемая норма тропонина может значительно варьировать в зависимости от применяемых тестов и находится в диапозоне 0,4 - 2,3 мкг/мл. При не осложненном течении инфаркта миокарда концентрация тро - понина Т снижается уже к 5 -6- му дню, а к 7 - му дню повышенные значения тропонина Т выяв - ляют у 60% больных. Специфичность опреде - ления тропонина Т в крови при инфаркте миокар - да составляет 90 - 100%. В первые 2 ч от начала болевого приступа чувствительность опреде - ления тропонина Т составляет 33%, через 4 ч - 50%, после 10 ч - 100%, на 7 - й день - 84%. Сле - довательно, определение биохимических марке - ров некроза миокарда – необходимый компонент комплексной диагностики инфаркта миокарда. Целью работы послужило создание гиб - ридных клеток, продуцирующих моноклональные антитела к препарату сердечного тропонина Т для конструирования ИХА - теста при диагностике инфарктного состояния. На решение данной це - ли были поставлены следующие задачи иссле - дования: проведение иммунизации мышей линии Balb/c тропонинами T, подготовка миеломных клеток, выделение иммунных спленоцитов имму - низированных мышей, проведение гибридизации иммунных спленоцитов и клеток миеломной линии. При проведении исследований применя - лись серологические, иммунохимические, био - технологические и другие методы. Начальным этапом проведения исследования явилась иммунизация лабораторных мышей линии Balb/c сердечными препаратами Troponin T from Human Hert («Sigma», США). Иммунизацию мышей про - водили по длительной схеме, включающей в себя четырехкратное парентеральное введение препарата в дозе 50 мкл с адъювантом Фрейнда в течение 8 - ми недель с двухнедельными пере - рывами. жүктеу/скачать 6,12 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|