Бие сүтінің ферменттік өнімінен сүт қышқылды бактерияларын бөліп алу және қасиеттерін анықтау Мазмұны
жүктеу/скачать 268 Kb.
|
dip -bie-sutinin-fermenttik-oniminen-sut-qyshqyldy-bakterijalaryn-bolip-alu-zhane-qasietterin-anyqtau-31 (1)
- Бұл бет үшін навигация:
- Ет –пептонды агар
| Гидролизденген сүт:
Қайнатып 450С –дейін салқындатылған бір литр майы алынған сүтке алдын-ала азғана мөлшерде жылы суда ерітілген 1 г құрғақ панкреатинді, біраз уақыт өткізіп 5 см3 хлороформ қосады. Колбаны тығыздап 400С термостатта 72 сағаттай ұстайды. Алғашқы тәулікте колбадағы қоспадан хлороформ буын игеру үшін колба ұзын ашып қайтып, бірнеше рет шайқап араластырады. Тиісті уақыт өткен соң қоспаны сүзеді, түтік суымен екі қайтара сүйылтып рН –ын 7.6-7.3 –ке жеткізеді де, пробиркаға құыйп 1200С ыстықпен 15 минут уақыт автоклавта залалсындандырады. Ал қатты орта жасау үшін гидролизатқа 1.5% агар қосады. Агар балқығаннан соң қоспаны сүзеді де оған 1.5 –2 % ұнтақ борды қосып араластыра отынып пробиркаларға құйып, залалсыздандырады . Петри табақшасына ортаны құғанда аяқша түбіне бордың біркелкі қабатпен араласуына баса назар аудару тиіс. Бұл орта сүт қышқылы бактерияларының өскенін барлық еру аймағына қарап анықтайды. Сонда түзілген сүт қышқылы бормен қосылады, бор еріп кетеді. Сүтте гетератрофты микроорганизимдер үшін қажетті 4.5% қант, 5 % белок, 1 % минерал қосылыстар және басқа да физиологиялық қоректі факторлар бар. Қоректі орта ретінде әдетте майы алынған сүтті қолданады . Ол үшін сүтті сепаратордан өткізеді де, біраз түндырады, бергілі варонкалармен сүттен кілегей бөліп тастайды.Қалдық майдан құтылу үшін көк сүтке 5 % хлороформ қосады да біраз қойып, бөледі. Ал хлороформ қалдығы сүтті залалсыздандырғанда ұшып кетеді де, бактериялар тіршілігіне нұсқан келтірмей, сүт ағынында үш тәулік бойына немесе 0.5 атмосфералық қысыммен 1100С –да 30 минут бойына автоклавта залалсыздандырады. Бұдан жоғары температурада залалсыздандырғанда қант карамелденіп, сүт қоңырқай тартады. Ет –пептонды агар Қатты қоректік орта болып саналды . Құрамы жағынан қатты қоректік орталар сондай сүйық орталармен бірдей. Тек мұндай ортаны қатайту үшін агар-агар немесе желатин қосады. Көбінесе бұл мақсатта агар-агарда қолданады. Оны белгілі бір технологиямен теңіз балдырларын алады. Оның құрамының басым көпшілігі көмірсулармен азотты заттардың қоспасынан тұрады. Салқын суға салғанда агар-агар ісінеді, ол температурасы 90-100 ыстық суда балқиды, мөлдіреп, жабысқақ күйге айналады. Агар-агар 400С –да іркілдек түрге айналады . Ет –пептонды агарды (ЕПА) дайындау үшін 1 литр ет пептонды сорпаға 2-3 % мөлшерде ұсақтап кесілген агар-агарды (адессалық агарды 6% алады) қосады. Агар-агарды кастрөлге салып үстіне сорпа құяды да 1200С 30 минуттай залалсыздандырады, дайын агарды тұндырады. Бұл үшін агар бар кастрөлді жылы автоклав ішінде түн бойына қалдырады Сонда ол жайлап суынады. Қатқан агарды шайқайды (кастролді алдын ала ыстық суға салып ысытады), тұнбаның төменгі жағын кеседі, ал беткі жағын кесіп алып балқытады. Оларды мөлдірлендірудің басқа да тәсілдері бар. Олардың ішінде ең қарапайым және оңайы балқытып 500С дейін салқытылған оларға екі еседей сұйытылған, дистилденген суды және көбіктендіре қатты қопсытылған тауық жұмыртқасының ақ уызын (бір жұмырқа белогы, бір литр ортаға арналады ) немесе қан сарысуын (10 мл 1 л ортаға орнап) қосады. Қоспаны 10 минуттай қайнатады. Мөлдірленген оларды сүзеді. Арасына ыстық су кұйылған екі қабырғалы металдан жасалған воронкаға төселген мақта, арқылы сүзеді. Сүзінді рН 7.2-7.4 –ке жеткізеді де пробиркаларға қүйып 1200С-да ыстықта 15-20 минут автоклавта залалсыздандырады. Егер оларды қиғаштап қатыру керек болса, агары бар пробирканы көлбейте орналастырған жөн. жүктеу/скачать 268 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|