Өсімдік ұлпаларын өсіру және биотехнология бойынша зертханалық
жүктеу/скачать 4,52 Mb. Pdf көрінісі
|
Өсімдіктер биотехнологиясы зертханалық сабақтар (1)
| № 3 жұмыс.
Қоректік орталар дайындау Кажетті материалдар мен аспаптар: Макро- және микроэлементтер тұздарының, фитогормондардың витаминдердің, глициннің, мезо-инозиттің, сахароза мен агардын концентрлі срітінділері. 50-1000 мл-лік өлшегіш стакандар, 250-500 мл-лік өлшегіш колбалар; 25-1000 мл-лік өлшегіш цилиндрлер; 1-25 мл-лік пипеткалар; пробиркалар; магнитті араластырғыш; су моншасы; электр плиткасы; автоклав. Жұмыстың орындалу тәртібі. 1. Макро- және микроэлементтер тұздарының, витаминдердің, осу реттегіштерінің концентрлі ерітінділерін дайындау. 2. 1 л коректік орта дайындау үшін концентрлі ерітінділердін әрқайсысынан 1 мл-ден өлшеп алып, үлгіде көрсетілген ретпен, көлемі 1 л болатын өлшегіш стаканға құяды. 3. Мезо-инозитті, глицинді, сахарозаны дистильденген судың аздаған мөлшерінде ерітіп (әрқайсысын бөлек), қоректік орта дайындалатын ыдыстағы алдыңғы срітінділерге қосады. 4. Дайындалған қорсктік орта қоспасын стаканнан өлшегіш цилиндрге ауыстырып, дистильденген сумен көлемін 950 мл-ге жеткізеді. 5. Ерітіндінің рН-ын қажетті мәніне дейін жеткізеді. Егер рН мәні дәл болмаса, онда өлшегіш цилиндрдегі қоректік ортаға бірнеше тамшы 1н НСI (егер ерітіндінің рН-ы сілтілік жаққа ауытқыса) немесе 1н NaOH (КОН) (сгер ерітіндінің рН-ы қышқыл жаққа ауытқыса) қосып, араластырады. Осыдан кейін оның аздаған бөлігін кішкене стаканға құйып рН-ын тексереді. Бұл операцияны ерітіндінің рН-ы нұсқадағы мәнге толык сәйкес келгенше қайталайды. 6. Пластинкалы агардың қажетті мөлшерін (6-7г) стакандағы қоректік ортаның аздаған мөлшеріне қосып, электр плиткасының үстінде, бірте-бірте қыздырып (қайнауға жеткізбей), үздіксіз араластыра отырып ерітеді. 7. Қоректік ортаны 50-60°С-ға дейін қыздырып, оған агардың ыстық ерітіндісін қосады. Түіршікті агарды қоректік ортаға алдын-ала ерітпей-ақ қосуға болады. 8. ортаға жылы дистильденген су қоса отырып, көлемін 1 л-ге дейін жеткізеді де, араластырады. 9. Дайын болған коректік ортаны пробиркаларға құйып (пробирка көлемінің 14 бөлігіне дейін), ауызын мақта тығынымен немесе фольгамен жабады да, металдан жасалған штативтерге қояды. 10. Штативтерді (пробиркаларымен бірге) автоклавқа салып 0,7-1,0 атм кысымда 15 мин стерильдейді, Осыдан кейін қоректік 7. Каллустарга морфологиялык сипаттама жасалады (түсі, құрылымы) 8. Каллус ұлпасының өсiм массасын аныктайды. Ол үшiн пассаж жасаганнан 10 күннен кейiн каллустарды торсионды таразыда елшейдi. Каллус ұлпасынын есiмiн мына формула бойынша есептейдi: 𝑤−𝑤 𝑤 мунда, W, - каллустын сонгы массасы, Wo-каллустын бастапкы массасы. жүктеу/скачать 4,52 Mb. Достарыңызбен бөлісу:
|