98
8.1.3. Белки Ras
Белки Ras часто упоминают как продукты протоонкогенов.
Это небольшие белки, состоящие из 189 аминокислотных остат-
ков с молекулярной массой 21 кДа. Ras — регуляторный транс-
мембранный G-белок, молекулярная структура которого хорошо
изучена. Гуанозинсвязывающий регион Ras имеет большую го-
мологию с
подобным регионом G-белков. С-конец Ras подвер-
гается в клетке посттрансляционной модификации — отщепле-
нию трех концевых аминокислот с добавлением фарнезильной
и пальмитиновой групп. Такие модификации позволяют Ras
закрепляться в плазматической мембране. В соответствии с ха-
рактером посттрансляционной модификации имеется четыре
изоформы Ras: N-Ras, H-Ras, и К-Ras (4А, 4B), кодируемые тремя
генами:
HRAS,
NRAS,
KRAS. K-Ras4А и K-Ras4B изоформы об-
разуются путем альтернативного сплайсинга (Henis et al., 2009;
Mo et al., 2018; Parker, Mattos, 2018). Процесс пострансляционной
модификации и локализации различных изоформ Ras приведен
на рис. 45: 1) Ras-фарнезилтрансфераза — переносит фарнезиль-
ную группу на цистеин мотива CAAX, где С — цистеин, А — ами-
нокислота с алифатической цепью, Х — любая аминокислота;
2) Ras-конвертирующий фермент 1 осуществляет расщепление
трипептида ААХ на конце Ras-белка. Данный процесс протекает
Рис. 45. Посттрансляционная модификация и локализация изоформ
Ras-белка (Rajalingam et al., 2007)
99
на поверхности ЭПР; 3) изопренилцистеинкарбоксиметилтранс-
фераза катализирует перенос метильной группы (Ме) на остаток
цистеина; 4) Ras-пальмитоилтрансфераза осуществляет перенос
пальмитата на молекулу Ras-белка; 5) после связывания с плаз-
матической мембраной Ras может подвергаться депальмитоили-
рованию и высвобождаться в цитозоль, откуда путем диффузии
поступает обратно в
аппарат Гольджи для последующего акта
пальмитоилирования; КККК — четыре остатка лизина, которые
способствуют взаимодействию изоформы K-Ras4B с отрицатель-
но заряженными группами плазматической мембраны в отсут-
ствие модификации пальмитатом.
Белки Ras влияют на пролиферацию, дифференцировку,
трансформацию и апоптоз, опосредуя действие митогенных
и ростовых сигналов в цитоплазме и ядре. В нормальных клетках
молекулы Ras присутствуют в
неактивной ГДФ-связанной кон-
формации. Внеклеточный стимул активирует белок SOS, кото-
рый инициирует удаление ГДФ и последующее связывание ГТФ.
Конформационные изменения, происходящие при этом в Ras-
белке, необходимы для взаимодействия с соответствующими эф-
фекторными молекулами и передачи сигналов. Далее происходит
гидролиз ГТФ до ГДФ и фосфата неорганического. Внутренняя
ГТФaзная активность сравнительно слабая, но для быстрой инак-
тивации сигнала она должна быть достаточно высокой. Для уско-
рения низкой скорости гидролиза существуют такие регулятор-
ные белки, как GAP (GTPase activating proteins), связывающиеся
с Ras- ГТФ и увеличивающие ГТФазную активность на несколь-
ко порядков. Уменьшение уровня Ras- ГТФ и увеличение уровня
Ras-ГДФ приводит к потере биологической активности Ras-белка.
Таким образом, активность самого Ras модифицируется неко-
торыми белковыми факторами. В отличие от α-субъединицы
Gs-белка, цикл Ras-белка требует участия двух дополнительных
белков — GEF и GAP. В нормальных клетках GAP является инги-
битором Ras, а GEF — активатором (Cherfils, Zeghouf, 2013; Hunter
et al., 2015).
Поскольку белок Ras, связанный с ГТФ, может взаимодей-
ствовать со своими эффекторами и у аппарата Гольджи, где про-
исходит процесс модификации молекулы белка пальмитатом,
и в период везикулярного транспорта, а также у плазматической
мембраны, то вероятно значение цикла пальмитоилирования/
депальмитоилирования заключается в
модуляции множества
100
сигнальных путей различной локализации (Ahearn et al., 2011).
Эффекторами белка Ras могут служить белок Raf — следующий
компонент в Ras/MAPK-сигнальном пути, фосфатидилинози-
тол-3-киназа (PI3K), ПКС и другие белки, вовлекающие его в дру-
гие клеточные функции. Мы рассмотрим прежде всего участие
белка RAS в активации каскада митоген- активируемых протеин-
киназ.
Достарыңызбен бөлісу: