Учебное пособие Красноярск сфу 2019 (07) ббк



Pdf көрінісі
бет39/42
Дата19.05.2022
өлшемі7,51 Mb.
#35069
түріУчебное пособие
1   ...   34   35   36   37   38   39   40   41   42
Байланысты:
Покровский Титова 2019 Уч Клеточная сигнализация

8.1.2. Адаптерные белки
В клетке существуют белки, названные малыми адаптер-
ными белками. Они не обладают каталитической активностью, 
а выполняют связующую роль между активированными ти-
розинкиназами и внутриклеточными сигнальными каскада-
ми. Чаще всего в структуре подобных белков присутствуют 
SH2 и SH3 домены, впервые обнаруженные при исследовании 
механизмов развития опухоли (саркомы). Семейство прото-
онкогенов, выделенное при этих исследованиях, получило 
название Src-семейства, а гомологичные домены, обнаружен-
ные в других белках, получили название SH2 и SH3 по анало-
гии с соответствующими участками Src белков (Src Homology 
domain 2 или 3).
Наиболее изучен адаптерный белок Grb2, молекулярная 
масса которого составляет 25 кДа. Он состоит из центрально-
го SH2 и двух фланкированных SH3 доменов. Взаимодействие 
с рецептором осуществляется через SH2 домен, который состо-
ит приблизительно из 100 аминокислотных остатков. В струк-
туре домена есть положительно заряженный карман, которым 
белок взаимодействуют с фосфотирозином рецептора. Стоит 
отметить, что наличие SH2 доменов присуще не только адап-
терным белкам, но и ферментам, которые выполняют в клетке 
разнообразные функции, например, фосфолипазе Сγ, Src-по-
добной нерецепторной тирозинкиназе и многим другим. В на-
стоящее время известно порядка 111 белков, содержащих SH2 
домены, которые разделены на 38 семейств (Liu et al., 2006, 
2012; Jin et al., 2009).
SH3 домены представляют собой белковые модули, распоз-
нающие богатые пролином последовательности. При помощи 
SH3 доменов Grb2 конститутивно ассоциирован с белком SOS 
(Son of Sevenless), который относится к группе гуаниннукле-
отид-обменивающих факторов (GEF, guanine exchange factor). 
Пока рецептор не связан с лигандом, комплекс Grb2-SOS лока-
лизован в цитоплазме. После активации рецептора комплекс 
транслоцируется к плазматической мембране, где конформа-
ционное изменение Grb2, индуцированное распознаванием 
фосфотирозина, способствует стимуляции SOS-белка, кото-
рый активирует следующий компонент сигнальной системы —
белок Ras (Kaneko et al.., 2008; Ahmed et al.., 2015).


98
8.1.3. Белки Ras
Белки Ras часто упоминают как продукты протоонкогенов. 
Это небольшие белки, состоящие из 189 аминокислотных остат-
ков с молекулярной массой 21 кДа. Ras — регуляторный транс-
мембранный G-белок, молекулярная структура которого хорошо 
изучена. Гуанозинсвязывающий регион Ras имеет большую го-
мологию с подобным регионом G-белков. С-конец Ras подвер-
гается в клетке посттрансляционной модификации — отщепле-
нию трех концевых аминокислот с добавлением фарнезильной 
и пальмитиновой групп. Такие модификации позволяют Ras 
закрепляться в плазматической мембране. В соответствии с ха-
рактером посттрансляционной модификации имеется четыре 
изоформы Ras: N-Ras, H-Ras, и К-Ras (4А, 4B), кодируемые тремя 
генами: HRAS, NRAS, KRAS. K-Ras4А и K-Ras4B изоформы об-
разуются путем альтернативного сплайсинга (Henis et al., 2009; 
Mo et al., 2018; Parker, Mattos, 2018). Процесс пострансляционной 
модификации и локализации различных изоформ Ras приведен 
на рис. 45: 1) Ras-фарнезилтрансфераза — переносит фарнезиль-
ную группу на цистеин мотива CAAX, где С — цистеин, А — ами-
нокислота с алифатической цепью, Х — любая аминокислота; 
2) Ras-конвертирующий фермент 1 осуществляет расщепление 
трипептида ААХ на конце Ras-белка. Данный процесс протекает 
Рис. 45. Посттрансляционная модификация и локализация изоформ
Ras-белка (Rajalingam et al., 2007)


99
на поверхности ЭПР; 3) изопренилцистеинкарбоксиметилтранс-
фераза катализирует перенос метильной группы (Ме) на остаток 
цистеина; 4) Ras-пальмитоилтрансфераза осуществляет перенос 
пальмитата на молекулу Ras-белка; 5) после связывания с плаз-
матической мембраной Ras может подвергаться депальмитоили-
рованию и высвобождаться в цитозоль, откуда путем диффузии 
поступает обратно в аппарат Гольджи для последующего акта 
пальмитоилирования; КККК — четыре остатка лизина, которые 
способствуют взаимодействию изоформы K-Ras4B с отрицатель-
но заряженными группами плазматической мембраны в отсут-
ствие модификации пальмитатом.
Белки Ras влияют на пролиферацию, дифференцировку, 
трансформацию и апоптоз, опосредуя действие митогенных 
и ростовых сигналов в цитоплазме и ядре. В нормальных клетках 
молекулы Ras присутствуют в неактивной ГДФ-связанной кон-
формации. Внеклеточный стимул активирует белок SOS, кото-
рый инициирует удаление ГДФ и последующее связывание ГТФ. 
Конформационные изменения, происходящие при этом в Ras-
белке, необходимы для взаимодействия с соответствующими эф-
фекторными молекулами и передачи сигналов. Далее происходит 
гидролиз ГТФ до ГДФ и фосфата неорганического. Внутренняя 
ГТФaзная активность сравнительно слабая, но для быстрой инак-
тивации сигнала она должна быть достаточно высокой. Для уско-
рения низкой скорости гидролиза существуют такие регулятор-
ные белки, как GAP (GTPase activating proteins), связывающиеся 
с Ras- ГТФ и увеличивающие ГТФазную активность на несколь-
ко порядков. Уменьшение уровня Ras- ГТФ и увеличение уровня 
Ras-ГДФ приводит к потере биологической активности Ras-белка. 
Таким образом, активность самого Ras модифицируется неко-
торыми белковыми факторами. В отличие от α-субъединицы 
Gs-белка, цикл Ras-белка требует участия двух дополнительных 
белков — GEF и GAP. В нормальных клетках GAP является инги-
битором Ras, а GEF — активатором (Cherfils, Zeghouf, 2013; Hunter 
et al., 2015).
Поскольку белок Ras, связанный с ГТФ, может взаимодей-
ствовать со своими эффекторами и у аппарата Гольджи, где про-
исходит процесс модификации молекулы белка пальмитатом, 
и в период везикулярного транспорта, а также у плазматической 
мембраны, то вероятно значение цикла пальмитоилирования/
депальмитоилирования заключается в модуляции множества 


100
сигнальных путей различной локализации (Ahearn et al., 2011). 
Эффекторами белка Ras могут служить белок Raf — следующий 
компонент в Ras/MAPK-сигнальном пути, фосфатидилинози-
тол-3-киназа (PI3K), ПКС и другие белки, вовлекающие его в дру-
гие клеточные функции. Мы рассмотрим прежде всего участие 
белка RAS в активации каскада митоген- активируемых протеин-
киназ.


Достарыңызбен бөлісу:
1   ...   34   35   36   37   38   39   40   41   42




©emirsaba.org 2024
әкімшілігінің қараңыз

    Басты бет