Рысбаева г. С
жүктеу/скачать 161,51 Kb.
|
Зертханалық сабақтарға арналған Әдістемелік нұсқау БТ негіздері 1-курс
- Бұл бет үшін навигация:
- Қажетті құрал-жабдықтар
- Жұмыстың орындалу тәртібі : Ет-пептонды бульон /ЕПБ/.
- Ет- пептонды агар /ЕПА/.
- Ашытқы автолизаты.
| Тапсырма: Келесі қоректің ортаны дайындау: етті су, етті-пептонды сорпа, етті пептонды агар, ашытқы автолизат, Сабураның қатты және сұйық ортасын, сыралы сусло-агарды, чапека ортасын.
Қажетті құрал-жабдықтар: Автоклав, Кох аппараты, электр қыздырғыш пеш, жас ет, дистильденген су, химиялық стакан 100, 200 мл, сүзгі(марля), мақта, 0,5% таза ас тұзының ерітіндісі, пептон, ас содасы, агар-агар, желатин. Жұмыстың орындалу тәртібі: Ет-пептонды бульон /ЕПБ/. Бульон дайындау үшін жас етті алып, оған су құйып қайнату керек. Дайын болған бульонды бірнеше рет сүзіп, бастапқы көлеміне жеткізіп су құяды. Оның үстіне 0.5% таза ас тұзын /NaCl/ және Етті суға 1% пептон 0,5% химиялық таза тұз және 10% су құямыз. Бульонды пептон ерігенше 10-20 минут қайнатады. Ортаның сутектік көрсеткіші /рН= 7,2-7,4 болғанға дейін 1% сода ерітіндісін құйып, 15-20 мин қайнатады ортаны қайта сүзеді. Залалсыздандыруды 1 атм. қысымда 30 мин өткізеді. қайнатамыз. Сосын ыстық сорпада РН 7,3-7,5 анықталады. Сорпаны пробиркаларға ұйып 15-20 мин 1200С-де стерильдейді. Ет- пептонды агар /ЕПА/. ЕПБ ортасына 2г агар қосады және агары өзгергенше қыздырады, ыстық күйінде мақта, дәке арқылы сүзеді. Немесе 1л етті суға 10г пептон және 5г тұз алып 30мин қайнатады. РН-ын анықтайды, фильтрлейді, архангельдің 30г агарын, қосамыз. (одессалық агар болса – 60г қосады), тегіс араласқанша қыздырады және реакцияны тексереміз. Залалсыздандыруды тұнық ортаны колбаларға бөліп құйып 15-20 мин, 30 мин 1 атм қысымда 1200С-да өткізеді. Етті су. Сүйектен етті, майдан, қабыршақтан және сіңірден ажыратады, ет турағыштан өткізеді, екі немесе 4 еселік кран суын құяды (салмағына қарай) және 1 сағат қайнатады. Сұйықты дәке немесе мақтамен сүзеді, сосын фильтр қағазымен сүзеді. Фильтратты өлшейміз және алғашқы көлеміне жеткізу үшін дистильденген су қосамыз. 3-5 метрлік ыдыстарға құйып 30-40минут 1200С залалсыздандырамыз. Ашытқы автолизаты. Бұл ашытқы автолизатты тығыз агар ортада негізгі қоректік субстратты дайындауға қолданады. Нанды және сыралы ашытқыларының 40-60% азотты заттар, және бірқатар ферменттер. Олардың өзіндік сіңірулеріне себепші болады. Ашытқы орталары азоттың аздығына және төмен дәрежелі көбіршіктенуіне қарамастан ісініп ұлғаюын қамтамасыз етеді. Наубайханаға тән пресстелген ашытқыны орташа бөліктерге бөліп ыдыстарға, автолизат осы ыдыстың 1/5 сыйымдылығын алу есебімен салады. (20л ыдысқа 4кг ашытқы). Ашытқылы ыдысты термостатқа 600 С температурада 2 сөткеге қояды. Ыдыстағы ашытқының сұйылу өлшеміне қарай оны бір келкі араласу үшін шайқайды. (1-2 рет, сөткеде). Автолиздің аяқталуы, оның толық сұйылуында болып табылады. Автолизат қоңыр түсті және жағымды иісті болуы керек. Егер осы процесс 580С температурада болса автолизаттың сапасы бұзылады. Автолиз сияқталған соң ыдысқа 3 реттік мөлшердегі жылы құбыр суын қосады. (16л суды 4кг ашытқыға). Араластырылған автолизатты 1-1,3 атм (120-1230С) –дағы автоклавқа стерилдеуге 30 мин қояды. Оны бірнеше күнге (5-7 күннен кем емес) қалдырады. жүктеу/скачать 161,51 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|