Определение водного потенциала листьевметодом Шардакова
Поступление воды в клетку определяется величиной сосущей силы (водного потенциала – ψН2О), зависящей от осмотического дав- ления (ψπ) вакуолярного сока и тургорного (гидростатического) дав- ления (ψр) клеточного содержимого.
Водный потенциал ψ – это сила, с которой растительная ткань насасывает воду. Его определяют для того, чтобы уловить начальные признаки обезвоживания растений и своевременно провести полив. Водный потенциал служит мерой энергии молекул воды и выражает- ся в тех же единицах, что и давление. Вода всегда движется в направ- лении от более высокого потенциала к более низкому. Растворы об- ладают потенциалом ψπ, это компонент водного потенциала, который определяется присутствием молекул растворенного вещества и кото- рый снижает энергию молекул воды. Поскольку ψ чистой воды равен нулю, поэтому водный потенциал любого раствора и биологических жидкостей имеет отрицательное значение.
Метод основан на подборе раствора, концентрация которого не изменяется при погружении в него растительной ткани. В этом случае величина водного потенциала равна осмотическому потенциалу. Водный потенциал показывает способность воды в системе совер- шить работу по сравнению с той, которую произвела бы при прочих равных условиях чистая вода, имеющая активность, равную 1. Иначе его можно определить как работу, необходимую для того, чтобы под- нять потенциал связанной воды до потенциала чистой, т.е. свободной воды.
Суммарный водный потенциал является наиболее удобным по- казателем для экологических исследований, где необходима характе- ристика состояния воды во всех частях системы почва – растение – атмосфера.
Чем ниже водный потенциал системы, тем с большей силой она поглощает воду.
Цель работы: знакомство с методом определения водного по- тенциала листьев растений, находящихся в разных условиях водо- снабжения, разных органов одного растения.
Объектисследования: листья капусты (Brassicaoleracea).
Ход работы. Пробирки расставляют в штатив в два ряда по пять штук. В первом ряду готовят по 10 мл 0,1 М; 0,2 М; 0,3 М; 0,4 М и 0,5 М растворов хлористого натрия путем разбавления 1 М раствора ди- стиллированной водой. Из пробирок первого ряда переносят по 0,5 мл раствора в пробирки второго ряда и закрывают их пробками. Из листа между крупных жилок сверлом вырезают 10 дисков. В каждую пробирку второго ряда опускают по два диска. Через 40 мин стеклян- ной палочкой удаляют диски, а растворы в пробирках второго ряда подкрашивают метиленовой синькой, взятой в небольшом количестве (на кончике проволоки). Много краски добавлять нельзя, так как это может вызвать увеличение концентрации раствора. Подкрашенный раствор набирают пипеткой, конец пипетки опускают в соответству- ющий исходный раствор в пробирке первого ряда, так чтобы уровень жидкости в пипетке несколько превышал уровень раствора в пробир- ке. Медленно выпускают жидкость из пипетки, отмечая направление движения струйки. Если концентрация, а следовательно и плотность окрашенного раствора увеличились, то струйка в исходном растворе пойдет вниз, если концентрация уменьшилась – струйка пойдет вверх. При равенстве концентраций (изотоническая) струйка равно- мерно распределится в исходном растворе.
Величину водного потенциала рассчитывают по уравнению Вант-Гоффа:
Р = - RTCi .101,3 кПа,
где Р– осмотическое давление, атм.;
R– универсальная газовая постоянная (0,0821 л атм/град*моль);
Т– абсолютная температура (273 0С+t комнатная);
С– концентрация раствора в молях;
i- изотонический коэффициент;
101,3– коэффициент перевода атмосфер в кПа.
Оформлениеработы. Результаты опыта занести в таблицу 15.
Сделать соответствующие выводы.