Рисунок 9. Структурная формула хлорофилла

Рисунок 9. Структурная формула хлорофилла

Продукты световой фазы фотосинтеза АТФ и НАДФ•Н исполь- зуются в темновой фазе для восстановленя СО₂ до уровня углеводов. Сущность темновых реакций фотосинтеза была раскрыта благодаря исследованиям американского физиолога Кальвина.

РАБОТА 26

Получение спиртовой вытяжки пигментов зеленого листа и исследование химических свойств пигментов
Пигментная система хлоропласта представлена пигментами двух типов - зелеными (хлорофиллы а и b) и желтыми (каротиноиды и ксантофиллы).
По своей химической природе хлорофиллы а и b – сложные эфиры дикарбоновой кислоты хлорофиллина (магнийпорфирины) (см. рис. 7).
Пигменты легко извлекаются из сухих или свежих листьев по- лярными растворителями (этиловым спиртом, ацетоном), которые разрушают связь хлорофиллов и ксантофиллов с липопротеидами пластид и этим обеспечивают их полное экстрагирование.
Цель работы: получение спиртовой вытяжки из зеленых листь- ев и ознакомление с некоторыми свойствами пигментов.
Объект исследований: листья крапивы (Urtica dioica).
Ход работы. Несколько листьев крапивы размельчить и расте- реть в фарфоровой ступке с небольшим количеством кварцевого пес- ка и 5 мл этилового спирта. Для нейтрализации кислотности добавить не кончике скальпеля мел, дать содержимому ступки отстояться и, сливая по стеклянной палочке жидкую фракцию, отфильтровать со- держимое ступки в пробирку через сухой бумажный фильтр.
Оставшуюся в ступке массу повторно растереть с 5 мл спирта и профильтровать через тот же фильтр.
Полученный фильтрат содержит набор всех пигментов, но из-за количественного преобладания хлорофиллов окрашен в темно- зеленый цвет.
а) Разделение пигментов по Краусу.
Метод основан на разной растворимости пигментов в различных органических растворителях - спирте и бензине. Отлить в пробирку
2-З мл спиртовой вытяжки и, добавив в неѐ двойное количество бен- зина, сильно взболтать, содержимое несколько раз. Дать отстояться. Происходит расслоение спирта и бензина; в верхний бензиновый слой переходят зелѐные пигменты и каротины, а ксантофиллы оста- ются в нижнем спиртовом слое, придавая ему золотистую окраску.
б) Омыление хлорофилла щѐлочью
К 2-3 мл спиртовой вытяжки пигментов добавить 1 мл. 20 %- ного раствора щѐлочи и взболтать. После смешивания экстракта со щѐлочью пробирку помещают в кипящую водяную баню. Как только раствор закипит, пробирку вынимают и охлаждают. К охлаждѐнному раствору добавляют равный объѐм бензина и несколько капель воды для лучшего разделения смеси. Затем содержание пробирки резко встряхивают и дают ему отстояться.
В бензиновый слой перейдут каротин и ксантофилл, а в спирто- вой раствор - натриевая соль хлорофиллиновой кислоты (зарисовать). В выводах записать реакцию омыления хлорофилла, в результа-
те которой происходит отщепление спиртов - метилового и фитило- вого, а двухосновная кислота хлорофиллин даѐт соль:

жүктеу/скачать 1,45 Mb.

Достарыңызбен бөлісу: