Методика исследования проводилась в соответствии с
унифицированными микробиологическими методами
исследования, применяемых в клинико-диагностических
лабораториях лечебно-профилактических учреждений [3].
Для выделения микрофлоры использовали 5¿ кровяной
агар, желточно - солевой агар, при определении бактерии
рода Streptococcus использовали также среду обогащения -
0,5 ¿ глюкозный бульон, а стафилококков – 6,5¿ солевой
бульон. Идентификацию стрептококков проводили с
помощью тестов– Шермена, стафилококков - тестов
Чистовича, для идентификации семейства Enterobacteriaceae
применяли биохимический ряд для определения рода и
вида выделенных культур, всего 12 тестов[4].
Для
г.Алматы
в
2014году
было
проведено
9228
бактериологических исследований биоматериала из зева, из
них по ЛПУ обследовано 6228 лиц, а также по ГКИБ- 3000
лиц. «Выявляемость» составила для ГКИБ - 84,6¿, по ЛПУ -
59,2¿, в общем по городу Алматы - 67,5%. Приведенный
показатель был вычислен в соответствии с [5] и определен,
как
отношение
числа
лиц
с
бактериологически
подтвержденным диагнозом к количеству обследованных
лиц.
Было
выделено
6228культур
различных
микроорганизмов из зева больных тонзиллитами (Таблица
1)
Таблица 1 - Объем бактериологических исследований биоматериала из ротоглотки от больных тонзиллитами по г. Алматы за
2014год
Медицинские
учреждения
Количество
обследованных лиц
Выделенные культуры
«Выявляемость»
ЛПУ
6228
3688
59,2%
ГКИБ
3000
2540
84,6%
Всего
9228
6228
67,5%
В 2014г в ЦБЛ были внедрены современные инновационные
методы выделения и идентификации микроорганизмов из
различных исследуемых биосубстратов. В частности, для
выделенияи идентификации стрептококков группы А
(Streprococcuspуogenesи
другие
β-гемолитические
стрептококки)
применяли
диски
с
бацитрацином,
позволяющими по зоне торможения роста определить
принадлежность к стрептококкам группы А и другим β-
гемолитическим стрептококкам. Для выделения и
идентификации
пневмококков
применяли
диски
с
оптохином,
дифференцирующие
пневмококки
от
зеленящих стрептококков потому же признаку. Для
дифференциации энтерококков (группы Д) использовались
диски с эскулином, образующими коричнево- черный
преципитат на желчном агаре. Пейзаж микроорганизмов,
выделенных из зева от больных тонзиллитами по ГКИБ,
представлен в таблице 2.
450
Таблица 2 - Пейзаж микроорганизмов, выделенных из зева от больных тонзиллитами по ГКИБ за 2014 г
Как видно их таблицы 2, большинство выделенных культур
относились к стафилококкам–79,4%, причем патогенные
стафилококки – плазмокоагулирующие и гемолитические
составили – 64.7¿, т.е основнуючасть выделенных культур.
На втором месте стояли стрептококки - около 16¿. Среди
выделенных видов превалировали также патогенные
стрептококки, такие как стрептококки группы А и β-
гемолитические стрептококки, пневмококки, а также
энтерококки( группа Д) и зеленящие стрептококки. В
незначительном
количестве
были
выделены
микроорганизмы семейства Enterobacteriaceae -2,2,¿ и
дрожжеподобные грибы- 1,3¿. Представитель семейства
псевдомонад
(Pseudomonas
aeruginosa)
и
неферментирующие грамотрицательные бактерии (НГОБ)
выделялись в количестве – 1,3¿ случаев. Следует отметить,
что
согласно
литературных
данных,
указанные
представители псевдомонад не способны сами по себе
вызывать деструктивные изменения тканей, но обладая
высокой
протеолитической
активностью,
вызывают
глубинное расплавление пораженных стафилококками или
стрептококками тканей ротоглотки, что резко осложняет
течение заболевания. Такие заболевания трудно подаются
лечению, так как известно, что Pseudomonas aeruginosa и
другие НГОБы обладают стойкой резистентностью к
большинству антибиотиков, применяемые при лечении .
Это относится и к дрожжеподобным грибам. По нашим
наблюдениям в случае их выделения(в смешанной культуре
с
микроорганизмами)
определение
антибиотикочувствительности
представлялось
затруднительным. Далее нами была предпринята попытка
выявить зависимость выделения той или иной культуры
(стафилококков, стрептококков, псевдомонад и т.д.) при
различных клинических формах заболевания (Таблица 3).
Таблица 3 - «Выявляемость» возбудителей заболевания при различных клинических формах тонзиллитов
Staphylococcus
Streptococcus
Ente
robacter
Citrobac
ter
Pro
teus
Ps.
a
e
ru
gin
osa
Н
Г
О
Б
Д
ро
ж
ж
е
п
одо
б
н
ы
е
г
ри
б
ы
H
y
ic
us
aur
e
us
in
te
rm
e
dius
hae
m
ol
y
tic
us
e
pid
e
rm
idis
sapr
op
hy
tic
us
e
n
te
roc
oc
cus
v
iridan
s
hae
m
ol
y
tic
us
pn
e
um
on
iae
cl
oac
ae
ae
ro
ge
n
e
s
K
os
e
ri
div
e
rs
u
s
fr
e
un
dii
re
tt
g
e
ri
v
ul
ga
ri
s
229
522
169
385
306
406
189
81
54
77
29
13
3
7
1
1
1
27
7
33
1305
(64,7%)
714
(35,3%)
401
42
11
2
34
33
2017 (79,4%)
401 (16%)
55 (2,2%)
1,3%
1,3%
451
Как видно из таблицы 3, наибольший процент при
различных формах заболевания ротоглотки приходился на
патогенные
стафилококки
(от
24,5¿
до
11,3¿).
Непатогенные стафилококки выделялись значительно
реже(от 13,7¿ до 5,6¿). На долю стрептококков
приходилось от 7,4¿ до 3,2¿. Следует отметить, что все
приведенные в таблице формы заболеванияявляются какбы
осложненными формами тонзиллитов, в связи с чем мы
наблюдаем
массивное
обсеменение
ротоглотки
стафилококками.
Это
подтверждает
выделение
стрептококков принеосложненной ангине в большом
проценте случаев (48,6¿).К осложнениям следует также
отнести,
по-видимому,
выделение
псевдомонад,
энтеробактерий, дрожжеподобных грибов, выделяющихся в
незначительномпроцентов случаев.
Далее нами была изучена антибиотикорезистентность
выделенных культур диско-диффузионным методом. Для ее
определения
применялись
диски,
импрегнированные
растворами
различных
антибиотиков,
а
именно:
бензилпенициллина, оксациллина, цефалоспоринов I-III
поколения, аминогликозиды (гентамицин, тобрамицин),
макролиды (эритромицин, кларитромицин), гликопептиды
(ванкомицин),
для
высокорезистентных
культур
фторхинолоны
(ципрофлоксацин,
офлоксацин),
карбопенемы и др.( Таблица 4)
Таблица 4 - Определение чувствительности выделенных культур к лекарственным препаратам
Примечание: * - не ставили
В таблице 4указана чувствительность культур к различным
антибиотикам. Как видно из таблицы, почти все культуры
стрептококков были чувствительны к пенициллину, а также
к
цефалоспоринам,
являющимися
основными
антибиотиками для лечения стрептококковой инфекции,
т.к. продукции β-лактамаз у стрептококков до настоящего
времени не выявлено.К аминокликозидам, фторхинолонам,
гликопептида
мотмечалось
также
высокая
чувствительность,
что
можно
использовать
для
определения антибиотикорезистентности у выделенных
культур.
При лечении стафилококковых инфекций, как известно,
препаратами
выбора
также
являются
β-лактамные
антибиотики.
Они
подразделяются
на
препараты,
чувствительные к β-лактамазами резистентные к ним.
Устойчивость
стафилококков
к
β
-
лактамным
антибиотикам связана либо с продукцией β-лактамаз, либо
с наличием ПсБ2а- пенициллинсвязывающего белка.
Дифференцировать эти механизмы резистентности можно с
помощью дисков с бензипенициллином и оксациллином.
Первый является показателем наличия у стафилококка β-
лактамаз, второй применяется для детекции наличия ПсБ2а.
Выявление резистентности к нему означает резистентность
ко
всем
бета-лактамнымантибиотикам
–т.е.
метициллинорезистентность.
Для
таких
культур
необходимо использовать другие лекарственные препараты
для лечения.
Как видно из приведенной таблицы, 47¿ изученных
культур были чувствительны к пенициллину, а 87¿ были
чувствительны к оксациллину и цефалоспоринам т.е не
обладали β-лактамазами, разрушающими эти препараты.
Однако как видно из данной таблицы, 53¿ были
резистентны к пенициллину, т.е. синтезировали β-
лактамазу,
а
13¿
резистентны
к
оксациллину
и
цефалоспоринам, т.е. обладали ПсБ2а, обуславливающему
метициллинорезистентность. Поэтому для лечения таких
инфекций необходимо использование другой группы
антибиотиков- фторхинолонов, макролидов и др.
Изучение
антибиотикорезистентности
Pseudomonas
aeruginosa
выявило
множественную
устойчивость
к
различным лекарственным препаратам, а именно к
бензилпенициллину, цефалоспоринам I-II-поколения. К
цефалоспоринам III- поколения половина (50¿) изученных
штаммов были чувствительны, в первую очередь к
цефтазидиму,
цефоперазону.
Из
аминогликозидов
в
исследование
необходимо
включать
гентамицин,
тобрамицин или амикацин, из дополнительных наибольшей
активностью обладали ципрофлоксацин и офлоксацин, а
также меропенем и имипенем.
Примерный
набор
исследуемых
антибиотиков,
позволяющих оценивать резистентность энтеробактерий,
включал
ампициллин,
тетрациклин,
хлорамфеникол,
фторхинолоны и др.
Выводы.
1.При определении результативности микробиологической
диагностики
тонзиллитов
выявлена
более
высокая
эффективность при применении современных методов
выделения и идентификации культур.
2.Установлен спектр микроорганизмов, выделенных из
ротоглотки при различных формах заболевания.
3.Основными
возбудителями
заболевания
явились
стрептококки и стафилококки
4.Выявлена
антибиотикорезистентность
выделенных
возбудителей, около половины стафилококков были
пенициллинорезистентными,
а
13¿
обладали
метициллинорезистентностью; 83¿ были чувствительны к
цефалоспоринам.
5.93-97¿ стрептококков были чувствительны к β –
лактамным препаратам – цефалоспоринам и пенициллинам,
соответственно.
Культуры
Чувствительность культур к лекарственным препаратам в процентах
пеницилли
ны
оксацилли
н
цефалос
порины
аминогли
козиды
макролид
ы
фторхино
лоны
Гликопепт
иды
карбопене
мы
Стрепто
кокки
97
*
93
62
32
86
56
*
Стафило
кокки
47
87
83
46
42
62
26
*
Псевдомо
нас
*
*
14
20
10
35
*
55
Энтеробакт
ерии
30
*
43
45
35
76
*
*
452
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1
Фазылов В.Х., Кравченко Г.П., Нагиманова Ф.И.. и др. Синдром тонзиллита в клинической практике. Учебное пособие для
ординаторов и интернов. - 2007. - №2. - С. 76.
2
Хуснутдинова Л.М. Микрофлора слизистой оболочки миндалин человека в норме и при патологии. // ЖМЭИ. - 2006. - №1. - С.
60-63.
3
Приказ МЗ СССР "Унифицированные микробиологические методы исследования, применяемых в клинико-диагностических
лабораториях " от 1985 № 535.
4
Методические рекомендации "Методы бактериологического исследования условно-патогенной микрофлоры в клинической
микробиологии " от 1999.
5
Розенфельд Б.Ф. Общие итоги анализа динамики и структуры ресурсного потенциала социальной сферы. - М.: 1995. – 348 с.
Е.Т.АЙМУРЗАЕВА, Н.П.ЧИЖОВА, Т.А. КИМ, Б.Б.АШИМОВА, Г.Т..СЕЙКЕТОВА
И.Жекенова атындағы қалалық инфекциялық аурухана,
Орталық бактериологиялық лаборатория: Алматы (Қазақстан)
ТОНЗИЛЛИТТЕРДІҢ ӘРТҮРЛІ ФОРМАЛАРЫМЕН АУЫРАТЫҢ ЕМДЕЛУШІЛЕРДІҢ, АУЫЗ ЖҰТҚЫНШАҒЫНАҢ АЛЫНҒАН
БИОМАТЕРИАЛДЫ, МИКРОБИОЛОГИЯЛЫҚ ӘДІСПЕН ЗЕРТТЕУ
Түйін: Бапта микробиологиялық зерттеуге тонзиллиттің әртүрлі формасы бойынша әкелінген материалдар: фолликулярлы,
лакунарлы, герпестиқ ангина, созылмалы тонзиллит, жедел респираторлы вирусты инфекция (ЖРВИ). Аңқа микрофлорасының
сандық және сапалық құрамы зерделенген. Ауыз жұтқыншақтан алынған микроорганизмдердің әсер ету спектрі анықталған.
Аурудың негізгі қоздырғыштары стрептококктар және стафилококктар екені анықталды. Стафилококктар аурудың асқынуын
тудырады. Қоздырғыштардың антибиотикке төзімділігі зерделенді. Стафилококктардың жартысына жуығы пенициллиндер
тобына төзімді, ал 13¿-ы метициллиндер тобына төзімді. Стрептококктардың көпшілігі бета-лактамды пенициллиндер мен
цефаллоспоринге сезімтал. Зерттеуден басқа дақылды идентификациялауда микробиологиялық диагностиканың заманауй
әдістері қолдануда нәтижелілігі жоғары. Стрептококктарды анықтауда бацитрацин дискісі, энтерококктарға эскулин мен өт,
пневмококктарға оптохин колданылады.
Түйінді сөздер: биосубстраттар, микрофлора, идентификациялау, антибиотиктерге тұрақтылық.
E.T. AYMURZAEVA, N.P. CHIZHOVA,T.A. KIM, B.B. ASHIMOVAG.T. SEYKETOVA
The name of Zhekenova, Centralized Вacteriological Laвoratory, Almaty (Kazakhstan)
MICROBIOLOGICAL TESTINGOF BIOLOGICAL MATERIALFROM THE OROPHARYNXOF PATIENTSWITH
VARIOUS FORMS OFTONSILLITIS
Resume: The article presents materials on microbiological investigations of patients with various forms of tonsillitis: lacunar, follicular,
necrotic, herpes. chronic tonsillitis, acute respiratory viral infection. The quantitative and qualitative composition of microflora throat
secretions. Established spectrum of microorganisms isolated from the oropharynx in various forms of disease. The main pathogens were
streptococci and staphylococci. Recent often stood in complicated forms of disease. Studied antibiotic resistance abjection. About half of the
staphylococci were penitsillinrezistentnymi, and 13% had methicillin-resistant. Most of the isolates were susceptible to streptococcus beta-
lactam drugs - penicillins and cephalosporins. Also investigated the effectiveness of the isolation and identification of cultures. High
effectiveness of microbiological diagnostics installed in the application of modern methods of investigation. For the identification of
Streptococcus used discs with bacitracin, enterococci - discs and bile esculin pneumococcal drives optohinom.
Keywords: biosubstrates, flora, identification, antibiotic resistance.
УДК [616.24-002-022-06:616.831-005]-084
Н.П.ЧИЖОВА, Е.Т.АЙМУРЗАЕВА, Г.К.АЛЬКУАТОВА, Т.А. КИМ, Ф.К.АГМАНОВА, М.Е.ЕСТЕМЕСОВА
Городская клиническая инфекционная больница им. И.С.Жекеновой,
Централизованная бактериологическая лаборатория г.Алматы (Казахстан)
ОСНОВНЫЕ ПАРАМЕТРЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ПО КЛИНИЧЕСКОЙ МИКРОБИОЛОГИИ
Определены основные параметры лабораторных исследований по клинической микробиологии: объем, удельный вес в общей сумме
лабораторных анализов и их структура. Структура лабораторных анализов была представлена диагностическими
исследованиями следующих заболеваний: ОКИ, дисбактериоза, ГСИ, заболеваний кожи и подкожной клетчатки (раневая инфекция),
урологической инфекции, гинекологических и акушерских заболеваний, вызванных условно-патогенными микроорганизмами.
Показатели эффективности лабораторных исследований были более высокими, чем при диагностических исследованиях на
патогенную микрофлору. Определен спектр микроорганизмов, выделенных из различных биосубстратов, что является
необходимым для определения этиологии этих заболеваний. Дальнейшее развитие исследований по клинической микробиологии
связанной с разработкой нормативной базы по указанному разделу медицины. В долгосрочной концепции развития лабораторной
медицины, клинической микробиологии отводится большое значение, что связано с востребованностью и важности указанных
исследований для установления этиологии заболеваний, вызванных условно-патогенными микроорганизмами.
Ключевые слова: неспецифические инфекции, биосубстрат, этиология, идентификация, резистентность.
453
Достарыңызбен бөлісу: |