Микроскопиялау кезеңдері
Тауық эмбрионына жұқтыру əдістерін сипаттаңыз
жүктеу/скачать 123,73 Kb.
|
| Тауық эмбрионына жұқтыру əдістерін сипаттаңыз. Жұқтыру үшін 9-10 күндік инкубация мерзімінің эмбриондары қолданылады. Материалдың бір сынамасын зерттеу үшін кемінде 6 эмбрион жұқтырады.Жұқтырар алдында эмбриондар алдын ала көкөніс-ішеді, қабығындағы қарындашпен əуе кеңістігінің шекарасын (нуги) белгілейді. Қан тамырлары арасындағы жұмыртқаның бүйірінен қабығын тесуге жəне сыналатын материалды инокуляциялауға арналған учаске белгіленеді. Нуга жəне материалды тесу жəне енгізу көзделген учаске жағынан қабықты Мұқият спиртпен сүртеді жəне күйдіреді. Əуе кеңістігінің ортасында жəне материалды енгізу орнында бүйірден тесік жасайды, содан кейін бүйірден тесік арқылы 2-3 мм тереңдікке 0,2 мл көлемінде сыналатын материалды енгізеді.
Эмбриондарды жұқтырғаннан кейін қабықтағы тесіктер парафинмен құяды жəне оларды термостатқа апарады, онда 37,5°температурада 72 сағат бойы инкубациялайды. Инкубация барысында оларды тəулігіне бір рет көкөніс өсіреді, өлген эмбриондарды ашқанға дейін тоңазытқышта 4° С-та сақтайды.7. Əуе кеңістігінің үстіндегі қабығын ашар алдында дезинфекцияланады. Содан кейін доғамен шекарада стерильді қайшымен қабықты кеседі, гюдкорлупалы қабықты пинцетпен абайлап алады, хориоаллантоис жыртып, қабықтың шетіне мембрананың жыртылған учаскелерін майыстырып алады. Бір тауық эмбрионынан 6-9 мл эмбрионды сұйықтықты жинауға болады. Алынған эмбрионалды сұйықтықтың үлгілерінің стерильділігін бақылау оның МП А жəне МПБ 0,2 мл себу жолымен жүргізіледі. Егістерді термостатта 5 күн бойы ұстайды. Бұдан басқа, əрбір эмбрионнан алынған эмбрионалды сұйықтықтың үлгілері гемагглютиндеу белсенділігіне тексеріледі. Гемагглютинация болған жəне бактериялық ластану болмаған кезде алынған сұйықтықтың үлгісін гемагглютинация реакциясында титрлейді. Егер бөлінетін ГА титрасы төмен болса, тауық эмбриондарында қосымша 2-3 соқыр пабсаж жүргізіледі. Бөлінетін вирустың белсенділігі АА болмаған жағдайда 2-3 жолаушыдан кейін одан əрі бөлініп шығуы, зерттелетін материалдың осы үлгісінен вирустың бөлінуі тоқтатылады.Бөлінген вирусты сəйкестендіруді жылқылардың тұмауы вирусының белгілі типоспецификалық сарысуымен гемагглютинацияны тежеу реакциясында жүргізеді. жүктеу/скачать 123,73 Kb. Достарыңызбен бөлісу:
|